一、乌贼墨多酚氧化酶的部分特性（论文文献综述）
吴佳[1]（2021）在《DHPM处理和Salecan添加量对低盐条件下肌原纤维蛋白理化特性和结构的影响》文中认为肌原纤维蛋白属于盐溶性蛋白,低盐及水溶液条件下的理化性质较差,限制了其加工利用程度,特别是在流体类、蛋白饮品类存在空白,因此改善该蛋白在低盐条件下功能性质具有重要意义。动态高压微射流（Dynamic high pressure microfluidization,DHPM）是近几年发展起来的“绿色”加工技术,在大分子改性方面具有显着的效果,因此受到了研究者的关注。目前多糖与蛋白相互作用对食品体系的影响也是研究的热点,多糖不仅具有生物活性功能,同时还对食品的品质起着重要的影响。Salecan是一种水溶性β-1,3-葡聚糖,具有多种生物活性,在食品具有广阔的应用前景,但目前关于Salecan在食品中的引用鲜见报道。本试验探讨DHPM处理和Salecan添加量对低盐肌原纤维蛋白理化特性和结构的影响,为蛋白多糖复合体系的食品开发奠定基础。（1）Salecan添加量（0～0.5%,w/v）对DHPM条件（20000psi,9次）下低盐肌原纤维蛋白理化特性有一定的影响。添加量小于0.4%（w/v）的Salecan对肌原纤维蛋白的溶解度（45.16～43.45%）影响不显着（P>0.05）,但添加量达到0.5%（w/v）时,蛋白溶解度显着降低（P<0.05）;0～0.3%（w/v）的Salecan对蛋白表面活性巯基含量影响不显着（P>0.05）,而添加量达到0.4%（w/v）时,蛋白表面活性巯基含量显着降低（P<0.05）。随着Salecan添加量的增加,蛋白表面的疏水性和体系微粒的zeta-电位绝对值呈现先显着升高后显着降低的趋势（P<0.05）,而体系微粒的zeta-粒径和表观黏度以及剪切应力呈现逐渐递增的趋势,这是Salecan的增稠效果和蛋白多糖相互作用的结果。Salecan添加量过多会降低DHPM对体系微粒的处理效果,当Salecan添加量在0.3%（w/v）时效果较好。（2）Salecan添加量对DHPM条件（20000psi,9次）下低盐肌原纤维蛋白的结构有一定的影响。激光共聚焦显微镜（Confocal laser scanning microscopy,CLSM）显示,添加0.3%（w/v）Salecan,观察到蛋白与多糖相互重合;添加0.5%（w/v）Salecan,蛋白和多糖又重新聚集,分子粒径变大。SDS-PAGE显示,在DHPM处理下,添加Salecan对肌原纤维蛋白电泳条带无影响。内源荧光光谱显示,经过DHPM处理后的蛋白,其最大荧光发射波长发生了红移,最大荧光强度也明显的增加;而添加Salecan会使蛋白的最大荧光发射波长发生蓝移。对于二级结构,Salecan的添加会使肌原纤维蛋白的α-螺旋、β-转角结构含量增加,无规卷曲含量降低。说明Salecan的添加会改变DHPM处理下肌原纤维蛋白的构象。（3）DHPM处理（0～25000psi、0-12次）能显着地提高蛋白的溶解度、表面疏水性、活性巯基含量以及zeta-电位（P<0.05）,显着地降低zeta-粒径（P<0.05）。随着DHPM处理压力的逐渐增大,蛋白的溶解度、巯基含量呈显着升高的趋势（P<0.05）,表面疏水性和zeta-粒径呈显着下降的趋势（P<0.05）,zeta-电位绝对值呈先增加后降低的趋势（P<0.05）。随着DHPM处理次数的增加,蛋白的溶解度和活性巯基含量显着提高、zeta-粒径显着降低（P<0.05）、疏水性和zeta-电位绝对值先显着升高后显着下降（P<0.05）。体系的黏度和剪切应力随压力和次数的增加不断下降。在相同的DHPM处理条件下,相比于纯蛋白体系,复合体系的蛋白溶解度显着降低（P<0.05）,表面疏水性、zeta-粒径和zeta-电位绝对值以及体系黏度和剪切力显着升高（P<0.05）,活性巯基含量在一定的DHPM处理条件下显着升高（P<0.05）。说明DHPM处理压力和次数对蛋白和多糖体系的理化特性有显着的影响。（4）经过DHPM处理后,蛋白大聚集体破碎、消失,蛋白粒径变小且趋于一致,在体系中的分布更加均匀,并观察到蛋白和多糖有发生重合;蛋白的最大吸收波长发生了红移,最大吸收光强度也明显增加。随着DHPM处理压力和次数的增加,分子量在200k Da附近和120～150k Da之间的蛋白条带逐渐被降解、消失,而在分子量60～120k Da之间增加了许多蛋白条带;二级结构中有序状态结构的α-螺旋含量逐渐降低,无序状态结构β-转角和无规卷曲含量明显增加。当压力达到20000psi,次数达到9次后,电泳条带和二级结构含量不再变化。在相同的DHPM处理条件下,复合体系的电泳条带与纯蛋白组无差异,但紫外吸收光光强有明显的增加,α-螺旋结构含量比纯蛋白组高,无规则卷曲则与之相反。综上所述,DHPM处理能使蛋白聚集体破碎、粒径和分子量变小,蛋白伸张,暴露出大量官能基团,增加了静电相互作用,进一步增加蛋白溶解度,改善低盐体系蛋白的理化特性和体系稳定性。DHPM处理下Salecan能与肌原纤维蛋白发生相互作用,可能是简单的物理缠绕或是非共价键的结合,进而导致蛋白的理化特性和结构发生改变,但过量的Salecan会降低DHPM对体系微粒的处理效果。总之,DHPM能使蛋白多糖复合体系变得均匀、稳定,对肌原纤维蛋白产品的开发具有重要意义。
戚英伟[2]（2020）在《‘黑柿’果皮色泽形成的机制研究》文中进行了进一步梳理成熟‘黑柿’的果皮颜色乌黑。目前关于‘黑柿’果皮色素的形成机理并不清楚。本文首先研究柿果皮常见色素,接着分离鉴定‘黑柿’果皮黑色色素,研究PPO基因在‘黑柿’果皮黑色色素合成中的功能,最后通过测定‘黑柿’果皮代谢物并结合转录组测序研究抑制‘黑柿’果皮黑色色素合成的影响因素。主要研究结果如下:1.柿果皮色素分析。类胡萝卜素和酚类是柿果皮中的常见色素。液相色谱检测结果表明酚类化合物和类胡萝卜素在柿果实成熟期间大量积累。果实发育期末‘黑柿’果皮中的类胡萝卜素以β-胡萝卜素为主,‘火罐’以番茄红素为主,‘金萍’果皮中的β-胡萝卜素和番茄红素含量差异较小。三个柿品种中的酚类化合物以原花青素B1、芦丁、金丝桃苷和表儿茶素为主。柿果皮中未发现花青苷类物质,‘黑柿’果皮所特有的黑色色素物质是一种未知色素。2.‘黑柿’果皮黑色色素物质是一种黑色素。该色素主要位于上表皮和皮下组织细胞的细胞壁。提取并纯化‘黑柿’果皮色素物质。提取的色素物质具有层状结构。可溶性试验和紫外-可见分光光度（UV-vis）分析结果表明,该色素是一类黑色素。傅里叶变换红外光谱（FT-IR）分析结果表明,该黑色素具有典型的吲哚结构、脂肪族C-H基团和酰胺Ⅰ带的芳环C=C的振动或COO-基团的对称拉伸等结构特征。柿黑色素的性质研究表明该黑色素具有良好的自由基清除能力和一定的体外抑菌作用。3.Dk PPO在‘黑柿’果皮黑色素形成过程中发挥重要作用。PPO酶活性和Dk PPO表达水平在‘黑柿’果皮着黑色期间显着升高。在‘黑柿’果皮转黑色前的果实中瞬时表达Dk PPO可显着提高注射孔附近‘黑柿’果皮组织中Dk PPO的表达,显着提高PPO活性,促进‘黑柿’果皮形成黑色素。相反,在‘黑柿’果实中沉默Dk PPO可以明显抑制‘黑柿’果皮黑色素的形成。4.强日光照射抑制‘黑柿’果皮黑色素的合成。果实发育期间,强烈的日光照射引起氧化胁迫,导致叶绿体破坏。强光胁迫改变了‘黑柿’果皮组织中的初级代谢和次级代谢。Dk PPO在‘黑柿’果皮转黑色时期的表达被强光显着抑制,PPO酶活性被显着降低,因而抑制果皮中酚类化合物的氧化聚合,‘黑柿’果皮黑色素的产生被强烈抑制。同时受胁迫果皮大量合成番茄红素和β-胡萝卜素,使‘黑柿’受胁迫的果皮色泽最终呈橘红色。5.转录组学分析发现多个与植物强光胁迫相关的基因和转录因子。其中c84983.graphc0（hsf30）、c89016.graphc0（hsf A6）、c90096.graphc0（hsf B2）、c125979.graphc0（hsp70）、c106044.graphc0（WRKY70）、c109109.graphc0（Dk WRKY22）和c109740.graphc0（Dk MYB8）可能在调控‘黑柿’抵御强光胁迫方面发挥重要作用。综上,‘黑柿’果皮中的黑色色素是一种黑色素。‘黑柿’果皮黑色素具有良好的抗氧化作用和一定的抑菌活性。该黑色素是一种多聚物,多酚氧化酶在其合成过程中起重要作用。成熟‘黑柿’果皮黑色素合成被抑制是由于果实发育期间强光胁迫导致PPO活性降低,无法有效催化氧化酚类化合物的聚合,黑色素的形成被强烈抑制。同时受胁迫果皮合成大量的番茄红素和β-胡萝卜素,使‘黑柿’受胁迫果皮色泽最终呈橘红色。转录组鉴定到的基因c84983.graphc0（hsf30）、c89016.graphc0（hsf A6）、c90096.graphc0（hsf B2）、c125979.graphc0（hsp70）、c106044.graphc0（WRKY70）、c109109.graphc0（Dk WRKY22）和c109740.graphc0（Dk MYB8）可能在‘黑柿’抵御强光胁迫方面发挥重要作用。
刘秋鸣[3]（2019）在《灰褐牛肝菌（Boletus griseus）黑色素制备、结构分析及其益生元活性研究》文中指出本文以云南产灰褐牛肝菌（Boletus griseus）为原料,制备灰褐牛肝菌黑色素。对该黑色素的结构进行解析,推测其结构式。制备了黑色素的氧化降解产物,对其进行化学组成及光谱学性质研究,进一步阐明了黑色素对益生菌的作用。主要研究结果如下:1.采用碱溶酸沉法制取灰褐牛肝菌黑色素粗提物,得率为10.38%,用酸水解和有机试剂对粗提物进行纯化处理,制得纯化后黑色素,标记为BgM,BgM不溶于酸性溶液、水溶液和常用有机试剂,溶于碱性溶液。BgM的紫外-可见吸收光谱最大吸收峰为214 nm,与天然黑色素的紫外最大吸收一致。灰褐牛肝菌黑色素粗提物色价为213,黑色素BgM色价的为954.8,达到粗提物的4.48倍,说明黑色素纯度有了很大提高。2.采用场发射扫描电镜、元素分析法、红外光谱法、核磁共振1H谱和13C谱、热解-GC/MS和UPLC-MS/MS等方法对灰褐牛肝菌黑色素结构进行解析。场发射扫描电镜图发现黑色素为不规则的片状颗粒,平均粒径约为1.25μm。元素分析结果显示,该黑色素的C、H、N、S和O元素的百分含量分别为56.38%、5.86%、6.17%、2.44%和28.04%,S/N和C/N分别为0.17和10.66,初步判定灰褐牛肝菌黑色素为真黑色素。红外光谱在3426 cm-1、1600 cm-1和1105 cm-1处有特征吸收峰,解析出BgM含有酚羟基、氨基、羰基、亚甲基和甲基。推测BgM主要骨架为苯环和吲哚,支链主要由烷烃、醇和脂肪酸组成。氨水-过氧化氢氧化降解产物BgM1通过UPLC-MS/MS分析得到四个一级质谱峰。综合以上分析结果,推测出BgM的化学结构,缩合分子式为[C28（OR1）4（OR2）3H11O6N4]n。3.采用超声辅助氨水-过氧化氢法和过氧化氢法氧化降解灰褐牛肝菌黑色素制得降解产物BgM1和BgM2。对降解产物进行了分析,结果表明与BgM相比,BgM1和BgM2具有广泛的溶解性,且BgM1更大程度的保留了黑色素原有的色泽。分子量测定结果表明,BgM1的分子量和分子量范围高于BgM2。热解-GC/MS分析发现,BgM1的热解产物共有52种,其中吲哚及其衍生物种类较多。BgM2的热解产物共有61种,主要是酰胺类、羧酸类、酮类和苯类,没有吲哚及其衍生物。以上结果表明对黑色素进行合适的降解可以改善其溶解性,其中氨水-过氧化氢降解产物BgM1在一定程度上保留了原有黑色素的色泽和骨架结构。4.利用非处方人肠道菌群益生菌活菌片作为发酵菌种,以人工胃液和人工小肠液模拟消化液,对BgM进行体外消化和肠道发酵研究。研究灰褐牛肝菌黑色素体外模拟消化产物DM对益生菌的增殖作用及发酵产物短链脂肪酸含量的变化。研究发现,DM对益生菌增殖具有一定的促进作用,且发酵产物中乙酸含量最高,其次是丁酸和异戊酸。DM组在发酵的大多数时间,其乙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸含量都高于阳性对照FOS组。结果表明灰褐牛肝菌黑色素可能是一种潜在的益生元,极具开发潜力。
胡沛然[4]（2019）在《六堡茶多酚氧化酶及其产生菌对茶叶品质的应用》文中提出六堡茶是以梧州大叶毛茶为原料,按特定的初制和精制工艺进行加工,具有“六堡香”及红、浓、陈、醇等独特品质特征的黑茶。发酵（渥堆）是六堡茶品质形成的关键,在高温、高湿度的条件下,微生物生长繁殖,以茶叶为底物发生如催化氧化茶多酚的系列反应。目前,关于六堡茶多酚氧化酶及渥堆微生物的研究很少,本文将茶叶多酚氧化酶、茶叶理化成分变化及微生物数量联系起来,深入理解渥堆时期六堡茶品质形成的过程;从六堡茶发酵样品中分离纯化得到多酚氧化酶同工酶,对其酶学特性进行研究,为后续酶促合成茶色素优化反应体系建立、酶固定化等领域提供理论指导;除此之外,从六堡茶渥堆样品中分离鉴定出的产多酚氧化酶嗜热菌,被应用于茶叶固体发酵模拟实验,对比无菌、传统及单菌株发酵对茶叶成分的转化效果,进一步说明了六堡茶渥堆时期色、香、味等品质成分形成的机理。本研究得到的实验结果如下:1、水浸出物是茶汤的主要呈味、呈色物质,它的含量与多酚氧化酶酶活高度正相关（r=0.8776）。渥堆时期茶叶茶多酚含量从16.6%降至8.2%,随着后期多酚氧化酶酶活升高,茶多酚下降速度加快,而游离氨基酸从40.1mg/g下降至9.9mg/g。在六堡茶渥堆过程中,茶黄素和茶红素均呈现下降趋势,分别从0.12%下降至0.05%和从5.24%下降至0.74%,茶褐素从2.53%上升至5.77%,分析出现这种变化的原因是多酚氧化酶酶活升高,催化了茶黄素、茶红素的进一步氧化。另外,六堡茶渥堆过程中的多酚氧化酶酶活与霉菌的数量同样呈高度正相关（r=0.9192）。多酚氧化酶酶活总体呈上升趋势,但渥堆前毛茶的多酚氧化酶经过杀青工艺已经钝化或失活,推测新的多酚氧化酶可能是由微生物产生。综上,多酚氧化酶对六堡茶品质形成起着重要作用。2、对六堡茶多酚氧化酶的提取进行优化,然后将渥堆前后两种茶样的粗酶液进行硫酸铵分级沉淀、选择合适的盐析饱和度、浓缩、经凝胶过滤层析将制得的样品进行SDS-PAGE分析。渥堆前毛茶PPO分子量在59kDa左右,而渥堆结束的茶叶样品出现了分别约为59kDa和70kDa的条带。分析这是因为渥堆过程中微生物作用产生了新的PPO,且该种PPO可能是真菌产生的漆酶。分子量为70kDa的PPO1的最适pH值为6.5、最适温度40℃、最适底物（邻苯二酚）浓度为0.5mol/L。分子量为59kDa的PP02的最适pH值为6.0、最适温度35℃、最适底物（邻苯二酚）浓度为0.5mol/L。3、利用传统培养法首次从渥堆茶样分离鉴定出嗜热菌,其中细菌5个属,14个种;霉菌5个属,9个种。通过选择性培养基颜色变化和液态培养酶活测定筛选出三株产多酚氧化酶嗜热菌,分别为Lichtheimia corymbifera（伞状毛霉菌）、Aspergillus tubingensis（塔宾曲霉）和Aspergillus fumigatus（烟曲霉）。此外,还通过液态发酵基础培养和茶汁培养绘制出目前课题组已从六堡茶中分离出的5种活性最强的多酚氧化酶产生菌的产酶曲线图。4、选择 Penicillium griseofulvum（灰黄青霉）、Aspergillus niger（黑曲霉）、Aspergillus fumigatus（烟曲霉）进行茶叶固体发酵实验,对多酚氧化酶产生菌在茶叶生物转化效果的应用进行研究。实验样品分为无菌、传统和三种单菌株发酵组,对40天内它们的茶色素、茶多酚及多酚氧化酶酶活变化进行测定。从生长情况上看,黑曲霉、烟曲霉比灰黄青霉和未灭菌的毛茶微生物更能在高温高湿的固体茶叶环境下良好生长。三种菌株发酵组的酶活均高于传统发酵和无菌发酵组。随着模拟发酵时间的增加,每组的茶多酚含量均出现不同程度的降低,其中烟曲霉发酵组对茶多酚的转化效果最为明显,传统发酵组次之。各发酵组的茶黄素含量均随着时间的增长而下降。传统发酵组、无菌组、灰黄青霉发酵组的茶红素、茶褐素呈现出明显的增长趋势。而烟曲霉组和黑曲霉组的茶红素下降,茶褐素上升。
戴宏杰[5]（2018）在《菠萝皮渣纤维素基水凝胶的制备、表征及其性能研究》文中指出菠萝（Ananas comosus L.Merryl）经鲜食或加工成罐头、果汁等将产生30%50%的皮渣废弃物,其主要由纤维素、半纤维素、木质素和果胶等物质组成。本文从菠萝皮渣中提取纤维素后进行改性并制备不同类型的水凝胶复合材料,对水凝胶的结构、溶胀性能、智能响应特性、吸附亚甲基蓝性能、固定化酶应用等进行研究,以期能为菠萝皮渣在水凝胶材料方面的应用提供理论和技术基础,为农产品废弃物资源的高值化利用提供基础数据。主要研究内容及结果如下:第一部分:离子液体中菠萝皮渣纤维素的改性及水凝胶制备研究在离子液体（1-丁基-3-甲基咪唑氯盐,BmimCl）中对菠萝皮渣纤维素（PPC）进行乙酰化改性并负载乌贼墨制备复合水凝胶。在不加催化剂的情况下,纤维素乙酰化反应在离子液体BmimCl中能够顺利进行,反应后纤维素晶体类型从I型转为II型。乌贼墨均匀分布在水凝胶表面,并能提高水凝胶的热稳定性。当乙酰化反应3 h、反应温度80℃、乙酸酐/AGUPPC摩尔比4:1和乌贼墨添加量20%时制备的水凝胶具有更好的亚甲基蓝吸附性能,吸附量可达到147.41 mg/g,而未添加乌贼墨制备的水凝胶吸附量仅为53.72mg/g。水凝胶对亚甲基蓝的吸附过程遵循准二级动力学模型,属于化学吸附。在离子液体BmimCl中进行PPC接枝丙烯酸反应并负载乌贼墨和高岭土制备成具有pH敏感性特征的复合水凝胶。乌贼墨和高岭土能够在水凝胶中均匀分布,增强水凝胶的热稳定性。水凝胶的溶胀过程符合Schott二阶动力学模型,且具有pH响应特性。添加10%高岭土和20%乌贼墨制备的水凝胶具有较好的吸附亚甲基蓝性能,吸附量为153.85 mg/g,吸附率为95.45%。水凝胶对亚甲基蓝的吸附过程遵循准二级动力学模型,属于化学吸附。第二部分:菠萝皮渣羧甲基纤维素基智能水凝胶制备及溶胀响应特性研究通过接枝聚合反应制备菠萝皮渣羧甲基纤维素（PCMC）/丙烯酸-丙烯酰胺/白土超吸水智能水凝胶。添加白土后水凝胶在蒸馏水中的溶胀率从420.17 g/g增加到515.24 g/g,在0.9%NaCl溶液中的溶胀率从28.03 g/g增加到37.89 g/g。溶胀过程符合Fickian扩散模型和Schott二阶动力学模型。水凝胶的溶胀具有明显的pH、盐和溶剂敏感性。在尿素溶液中具有高溶胀率,可作为化肥缓释剂和保水剂应用到农业领域。以PCMC、明胶（GL）和海藻酸钠（SA）为原料,通过CaCl2和戊二醛双交联制备具有多重智能响应性的天然聚电解质复合水凝胶。随着水凝胶中PCMC比例的增加,水凝胶表面孔状结构增加,溶胀率增加,溶胀过程遵循Fickian扩散模型和Schott二阶动力学模型,溶胀行为具有明显的pH敏感性和盐敏感性特征。施加直流电场后,水凝胶出现一定程度的形变弯曲行为,具有明显的电场敏感性。弯曲程度与电解质NaCl溶液浓度、pH值和电场强度有关,并呈现可逆弯曲行为。制备的水凝胶在药物输送、生物传感器、人工肌肉领域具有一定的应用前景。第三部分:菠萝皮渣羧甲基纤维素基复合水凝胶的制备及应用研究以PCMC和聚乙烯醇（PVA）为基础原料,介孔二氧化硅SBA-15为功能材料,采用冻融循环法制备PCMC/PVA/SBA-15复合水凝胶,并通过物理吸附和戊二醛交联共固定化木瓜蛋白酶。PCMC、PVA和SBA-15可依靠氢键相互作用连接形成交联结构。添加SBA-15可产生致孔效应,添加PCMC后的水凝胶呈现出更均匀、尺寸更大的孔状形态,同时提高水凝胶的热稳定性。水凝胶的制备工艺影响固定化木瓜蛋白酶活力,最优的固定化木瓜蛋白酶条件是:木瓜蛋白酶浓度3 mg/mL、酶溶液pH值6.5、戊二醛浓度0.75%和交联时间1.5 h。固定化后的木瓜蛋白酶具有明显的pH敏感性,同时pH、温度和储存稳定性也得到一定程度的提高。以PCMC、PVA为基本原料,加入无机粒子氧化石墨烯（GO）和皂土（bentonite）,通过冻融循环法制备了PCMC/PVA/GO/bentonite复合水凝胶。PVA、PCMC、GO和皂土之间存在氢键作用,GO和皂土能够均匀分散在水凝胶网络中并起到物理交联剂的作用。GO和皂土能够促进水凝胶孔状结构的形成,提高水凝胶的热稳定性和溶胀性。水凝胶的溶胀过程具有pH敏感性,在pH 8.0时具有最大的溶胀率。水凝胶对亚甲基蓝的吸附性能受温度、pH值和染料浓度影响;添加GO和皂土能增强水凝胶的吸附亚甲基蓝性能。水凝胶PVA/PCMC/GO/bentonite使用四次数后仍保持92.76%的吸附量,具有良好的循环使用性能。吸附过程遵循准二级动力学吸附模型和Langmuir等温吸附模型。
杨丽芝[6]（2016）在《南海鸢乌贼墨汁多糖分离纯化与活性研究》文中认为鸢乌贼（Sthenoteuthis oualaniensis）资源丰富,广泛分布于印度洋和太平洋的热带、亚热带海域,其中以南海海域数量较大,是一种极具开发潜力的资源,而乌贼墨中富含多种活性物质,其主要活性成分是黑色素和蛋白多糖复合体。多糖具有抗氧化、免疫调节和降血糖等诸多生物活性,且来源广泛,目前,国内外学者对动物来源的活性多糖研究报道很多,但从未涉及南海鸢乌贼墨汁多糖。本文主要对南海鸢乌贼墨汁营养成分,墨多糖提取、分离纯化及抗菌、抗氧化活性进行了初步研究,并考察了其在罗非鱼片防腐保鲜中的效果。主要研究结果如下:1.采用原子吸收仪、气相、液相色谱及一些常规的化学方法对南海鸢乌贼（Sthenoteuthis oualaniensis）墨汁的基本营养成分及氨基酸、脂肪酸、常量及微量矿物元素和维生素的质量分数进行了测定,结果显示,墨汁中基本成分的含量分别为:水分65%,粗蛋白30.6%,粗脂肪0.7%,灰分2.08%。墨汁含有16种氨基酸,包括8种必需氨基酸,1种半必需氨基酸,必需氨基酸比例为37.2%,鲜味氨基酸为33.2%。墨汁中含有13种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸相对质量分数为64%,同时富含钾（K）、钠（Na）、钙（Ca）、镁（Mg）等常量矿物元素和锌（Zn）、铁（Fe）等微量元素以及维生素B1（VB1）、维生素B2（VB2）、维生素E（VE）等水溶性、脂溶性维生素。2.为探索南海鸢乌贼墨汁多糖的最佳提取工艺,根据中心组合（Box-Benhnken）实验设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,得到鸢乌贼墨汁多糖的最佳工艺条件为:采用水提醇沉法,料液比1:2、浸提液pH5.5条件下提取、木瓜蛋白酶1.00%、1/4体积氯仿、正丁醇（体积比4:1）两步去除杂质蛋白,最后无水乙醇沉淀得到粗多糖。此最佳工艺条件下,粗多糖得率为0.91%,多糖含量为9.8%。3.为分析墨多糖组分及单糖组成,将鸢乌贼墨多糖依次经DEAE-52离子交换柱、HR-300凝胶柱分离纯化,收集洗脱液,结果得到3个不同糖峰:SIP1、SIP2、SIP3。采用PMP-衍生法将SIP1、SIP2、SIP3进行衍生检测其单糖组成,结果表明:SIP1是由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖三种单糖按照一定比例缩合而成;SIP2和SIP3分别是由D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖及L（-）岩藻糖五种单糖按照不同比例缩合而成。4.为研究鸢乌贼墨多糖分离纯化组分SIP1的生物活性,测定了SIP1的抗菌活性、抗氧化活性,研究了SIP1在罗非鱼片防腐保鲜中的作用效果。得到SIP1对大肠杆菌存在一定的抑菌活性,随着SIP1样品浓度的增加,在一定浓度范围内,抑菌效果与样品浓度呈现一定的量效关系,当SIP1质量浓度达到10mg/m L时,几乎完全抑制大肠杆菌的生长繁殖;采用体外抗氧化的方法测定了SIP1组分对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力,得到在一定浓度范围内,DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力和SIP1具有剂量依赖效应,随着SIP1浓度的增加,清除能力增强,且SIP1对DPPH·清除能力的IC50值约为8.45（mg/m L）,SIP1对羟自由基的清除能力的IC50值约为6.5（mg/mL）;向新鲜罗非鱼片浸泡液中添加不同质量浓度的SIP1,测定鱼肉中细菌总数,结果显示:经添加SIP1的溶液浸泡的罗非鱼片试验组表现出良好的抑菌效果,并随SIP1质量浓度的增加,抑菌效果增强。综上所述,SIP1呈现出较好的抗菌、抗氧化及防腐保鲜作用。
杨贤庆,杨丽芝,黄卉,李来好,邓建朝,吴燕燕,戚勃[7]（2015）在《海洋头足类墨汁中活性成分的研究进展》文中研究表明海洋头足类如鱿鱼、乌贼等的加工副产物墨汁中具有黑色素、多糖、肽类物质等多种活性成分。本文主要简述了海洋头足类墨汁中各活性成分的提取方法及其功能活性等方面的研究进展,以期为海洋生物活性物质的开发利用提供参考。
柴保中[8]（2017）在《中间气单胞菌WS菌株黑色素合成调控研究》文中研究说明气单胞菌（Aeromonas）是一种常见的条件致病菌,该属的不少菌株都被报道具有黑色素形成能力。大量研究发现黑色素是致病菌的毒力因子之一,但气单胞菌的黑色素代谢基因及作用机理却鲜见报道。中间气单胞菌（A.media）WS菌株是实验室前期自武汉东湖分离得到的一株高产黑色素菌株。前期工作发现,在该菌的培养液上清中可检测到L-多巴（L-DOPA）的存在,暗示其可通过酪氨酸酶途径合成多巴黑色素;但奇怪的是该菌的酪氨酸酶活性只有通过活性染色（native-PAGE）的方法才能检测到,通过蛋白质N端测序结合Adaptor PCR方法克隆到的一个酪氨酸酶编码基因（melA）在大肠杆菌中进行异源表达时也未能使宿主细胞形成产黑表型。为了弄清前期克隆的melA是否确实是WS菌株的黑色素形成关键基因,本研究首先对酪氨酸酶基因的大肠杆菌表达体系进行了研究,结果发现无论是单基因作用的蜡状芽胞杆菌（Bacillus cereus）来源酪氨酸酶,还是以操纵子行使功能的链霉菌来源酪氨酸酶MeIC均能在pET载体系统中高效表达,使大肠杆菌BL21（DE3）产黑;其His-tag标签的纯化产物也能检测到明显的酪氨酸酶酶活,且在以L-DOPA为底物的非变性蛋白胶上检测到活性条带;而WS菌株来源的TyrA（melA的编码产物）却在以上检测体系中均显示阴性,不能使宿主细胞获得变黑表型。再进一步采用大引物PCR的方法对TyrA上被认为是酪氨酸酶活性中心的六个组氨酸位点进行定点突变,构建了系列His（x）Asn突变株。对突变株进行酪氨酸酶活性测定,结果发现所有突变株的酶活性与原始酶相比并没有显着差异。最后,我们以氨苄青霉素作为WS菌株的抗性筛选标签,采用pDM4自杀质粒系统对WS菌株染色体上的melA进行了敲除,但得到的敲除突变株WS △melA的黑色素形成能力和野生菌株相比并无明显改变,进行native-PAGE活性染色时突变株和野生菌株的相应活性染色条带也无任何改变。上述结果表明,我们前期克隆的melA并不是WS菌株中控制黑色素合成的关键基因,其编码产物甚至可能并非酪氨酸酶。在采用鸟枪法克隆WS菌株黑色素合成基因始终未获成功、通过构建转座子插入突变文库鉴定色素形成关键基因也遇到诸多困难的情况下,我们对WS菌株进行了全基因组测序,以期获得有用的黑色素合成相关数据资源。采用Solexa末端双向测序方法完成了 WS菌株基因组的草图测序,并在此基础上进一步采用ABI 3730xL测序仪、Roche 454GS FLX及Pacbio RS Ⅱ测序系统相结合的优化方案完成了其完成图的测序。基因组分析结果发现,该基因组由一个4,777,154 bp的染色体和一个大小为11,276 bp的环形质粒pWSY组成,共线性分析结果发现该基因组与嗜水气单胞菌的基因组相比存在较多的重排插入现象。通过pfam00264结构域扫描方法对多巴黑色素合成通路进行了分析,没有发现典型酪氨酸酶编码基因的存在,但多酚氧化酶结构域扫描的结果中检测到了一个漆酶（Laccase）类似编码基因yfiH;同时还找到了一些与细菌脓黑色素合成相关的尿黑酸（Homogentisate,HGA）代谢的一些主要基因。而此前包括本实验室在内的研究者从未在气单胞菌培养物中检测到HGA的存在,且这些HGA相关基因在产黑和不产黑的气单胞菌中均普遍存在。此外,通过WEGO工具的GO功能进行分类分析,预测到WS菌株基因组上有305个基因参与色素形成过程,包括一些DNA与RNA的调控层面及蛋白代谢方面的编码基因,它们在已报道的铜绿假单胞菌P14菌株黑色素突变文库中也被发现;此外,这些基因中有64个预测是与环境应答相关蛋白的编码基因,暗示着黑色素合成是WS菌株对环境适应性的表现。对WS菌株培养过程中的中间代谢产物用高效液相色谱技术（HPLC）再次进行了系统分析,结果在一些特定时期的培养物中检测到了 HGA的存在,并由实验室另一位同学证实该菌的黑色素主要是通过HGA途径合成的脓黑色素,相关基因的缺失会导致细胞在LB培养基发酵时几乎完全失去产黑能力。但有意思的是,在该菌的培养液中始终可检测到L-DOPA的存在。为了了解WS菌株在形成脓黑色素的同时是否也可以形成多巴黑色素,我们采用红外光谱（IR）、毛细管电泳（CE）及电喷雾质谱（ESI-MS）对该菌的黑色素进行了检测,结果显示该菌株的黑色素组分中存在多巴黑色素的基本单元5,6-二羟基吲哚,说明该菌可以合成由脓黑色素和多巴黑色素组成的混合色素。对该菌株的细胞总蛋白进行native-PAGE活性染色,可以观察到两条活性染色带,说明该菌可能存在两个具有催化多巴合成黑色素能力的多酚氧化酶。由于基因组分析中得到的漆酶YfiH属于多酚氧化酶,首先我们对其编码基因yfiH进行敲除,结果发现以多巴为底物的活性染色条带其中之一消失,说明YfiH是两个多酚氧化酶之一（命名为PPO1）。进一步采用液质联用蛋白质质谱技术结合WS菌株基因组数据库对另一个多酚氧化酶进行鉴定,在获得的55个质谱结果中我们通过信息学分析推测其中标注为过氧化氢酶（Catalase,CAT）的蛋白可能具有多酚氧化酶活性。对CAT缺失株WSAkatE进行活性染色发现,另一条活性条带也消失,说明katE编码蛋白是WS菌株中的另一个多酚氧化酶活性蛋白（命名为PP02）。对双重突变株WS△yfiH △katE的活性染色检测发现相应的两条多酚氧化酶条带均消失不见,进一步证实了上述结果。漆酶表现多酚氧化酶活性的现象已经在生物界被普遍证实,但原核来源过氧化氢酶表现出多酚氧化酶活性的现象尚未见报道。首先,我们对推测的CAT进行了过氧化氢酶功能（CAT活力）的进一步验证。通过试剂盒检测发现,WS野生菌株胞内液的CAT活性明显（约为3.68U/mL）;而突变株WSAkatE无论在胞内还是胞外均无法检测到CAT活性,这说明推测的CAT是过氧化氢酶蛋白,这与信息学上KatE结构域的预测结果一致。具有KatE结构域的过氧化氢酶在其他细菌中也存在,比如大肠杆菌BL21（DE3）中的过氧化氢酶其中之一中的Hpii蛋白。采用λ噬菌体的Red重组系统对其编码基因hpii进行缺失,细胞的过氧化氢酶活性降低到野生菌株的20%。由于Hpii与CAT的氨基酸同源性达到47%,因此它可能也存在双重活性。进一步对CAT和Hpii都进行了异源表达,两者的纯化产物检测结果显示均表现出过氧化氢酶和多酚氧化酶双重活性,可见WS菌株中CAT的多重酶学活性现象可能是细菌演变过程中的一种普遍进化策略。在确定了活性染色法观察到的WS菌株二个多酚氧化酶（PPO1和PP02）的基础上,我们对两者与该菌黑色素合成的相关性进行了研究。对YfiH（即PPO1）缺失株WS△yfiH的检测发现,该菌的黑色素合成能力和野生菌株相比并无明显变化（约10%的下降）,说明YfiH与WS菌株的色素形成关系不大。而CAT（即PPO2）缺失株WS △katE的黑色素合成不仅在产量上大幅度下降（超过50%）,其合成过程相对于WS野生菌株而言也大幅度提前（从24 h提前至15 h）,这与已经证明的WS菌株以尿黑酸通路为该菌黑色素合成主要途径的结论并不完全相符。由此我们推测细菌黑色素的合成会受到胞内氧自由基（ROS）水平的调节。胞内ROS的检测结果发现,WS野生菌株在黑色素合成过程中胞内ROS水平会上升,最终值大约是黑色素合成前的6.5倍（以ROS-B表示）;而WS AkatE突变株在黑色素合成前一时刻,胞内ROS水平由于CAT的缺失而失调,其值略高于ROS-B,但在黑色素合成后则会下降至与ROS-B相当的水平。黑色素具有清除氧自由基的能力,在面对胞内氧自由基压力的时候可以部分行使CAT相关酶类的功能,因此突变株WS AkatE的黑色素合成过程被提前以维持胞内的ROS水平的上限,这个现象与真核生物中的相关报道一致。同时,由于在对黑色素的研究报道中显示黑色素合成过程也会产生一定的氧自由基,因此突变株WS△katE在通过细胞组分上黑色素对氧自由基清除的同时,在胞外黑色素水平方面也会相对减少以维持胞内ROS水平。由此可见,胞内ROS水平的压力是突变株WS△katE黑色素合成过程提前的原因,而ROS的最终平衡也是突变株胞外黑色素产量下降的原因之一。采用pBBR1MCS-5-katE回补质粒对突变株WS△katE进行了回补,结果显示回补菌株在native-PAGE活性染色条带及黑色素合成表型方面均得到了回复。综上,本文通过对中间气单胞菌WS菌株全基因组的测序分析以及在生物学上对该菌株黑色素合成调控的研究,将为进一步揭示气单胞菌黑色素的合成机理及生物学功能奠定理论和技术基础,也可为研究黑色素与生物对环境的适应性进化提供一定的参考基础。
沈雪芳[9]（2015）在《八棱海棠（Malus robusta）两个多酚氧化酶基因的克隆及降解酚类化合物的初步功能鉴定》文中研究说明酚类污染对人类的生存环境产生严重威胁,污水中的酚类化合物能够毒死水生生物,危害作物,污染水源,并严重损害人类的身体健康。这类污染物质化学性质稳定,来源广泛,难以降解,是工业、农药、材料生产中产生的一类主要高毒污染物。利用植物降解的方法处理酚类化合物是一种创新、经济且无二次污染的方法。目前,有关植物修复有机污染物的研究和报道较少,并且使用果树的多酚氧化酶用于有机污染物修复的研究尚未见报道。从植物中克隆出能够降解特定污染物的高效基因,有针对性的转到另外一种植物中并发挥这个基因的降解功能,在有毒有害污染物植物治理中显示出巨大的潜力。在本研究中,利用RT-PCR（reverse transcription PCR）技术从八棱海棠cDNA文库中克隆到两个基因,命名为MdPPO2B、MdPP03B,cDNA全长序列1773bp、1788bp。以八棱海棠基因MdPPO2B、MdPPO3B为研究对象,运用现代生物学手段对其进行了生物信息学、在毕赤酵母中的分泌表达和有机污染物的抗性分析,所获得的主要结果和结论如下:1、生物信息学研究结果表明:通过在GeneBank上进行同源性分析,结果发现MdPPO2B、MdPPO3B基因分别在169～374、165-374氨基酸区域与酪氨酸酶超级家族核心序列高度同源,含有高度保守的2个亚结构包含两个铜离子。构建的同源进化树表明,MdPPO2B、MdPPO3B在进化关系上与苹果、梨、枇杷等最近,绣线梅、甜梅次之。同源建模SWISS-MODEL的结果表明,这两个基因的蛋白都含有三个保守结构域。此外,在C端有一个高度保守的序列,这个家族的许多成员来自植物的多酚氧化酶。2、八棱海棠两个多酚氧化酶基因MdPPO2B、MdPPO3B在巴斯德毕赤酵母中得到了有效的表达。通过分光光度法,以邻苯二酚作为底物,确定了八棱海棠两个PPO最适温度、温度稳定性、最适pH、金属离子和抑制剂对酶活影响等酶学性质。两个PPO分别在pH6.5、pH7.0和40℃下,表现出最大酶活力。在4mM下,Cu2+、Mg2+、Fe2+表现出对酶活力的促进作用,而Zn2+、Ca2+、Fe3+抑制酶活力。1mM的EDTA、柠檬酸、L-半胱氨酸对PPO活性的抑制率达50%以上。以邻苯二酚、焦性没食子酸作为底物时,MdPPO2B和MdPPO3B Km,值分别为0.167mM、7.92mM;0.167 mM、8.68 mM。3、为了进一步分析MdPPO2B和MdPPO3B基因的功能,通过构建农杆菌-植物双元表达载体,以改造模式植物拟南芥,研究利用植物降解污染物方法。本试验中获得的转基因和野生型株系在生长状态与外部形态上没有可见的差异。通过分析发现,MdPPO2B、MdPPO3B转基因植株对芳香族化合物苯酚的耐受性相对于野生型拟南芥植株有了显着的提高,并显示出较高的吸收苯酚的能力。可见,MdPPO2B、MdPPO3B转基因植物的PPO活性在植物降解酚类化合物过程中的重要性,使用果树来源的多酚氧化酶基因用于有机污染物修复,对于环境治理具有较好的应用前景。
王和利[10]（2012）在《核桃青皮PPO的分离纯化及部分酶学性质研究》文中指出多酚氧化酶是一种末端氧化酶，普遍存在于植物体内的非线粒体中。新鲜水果、蔬菜容易发生褐变，主要和其体内的多酚氧化酶有关。核桃青皮作为核桃生产中的副产品，利用的非常少，我国的核桃生产量大，所以其青皮的产量也高，如果不加以利用，一方面是对资源的浪费，另一方面也会对环境造成污染。因此本文以核桃青皮为研究对象，用丙酮沉淀、金属螯合亲和层析的方法对核桃青皮PPO进行分离纯化，通过Native-PAGE电泳进行纯度鉴定；同时对核桃青皮PPO的部分酶学性质进行研究，以期为核桃青皮的回收利用提供理论依据，主要研究结果如下：1．确定了核桃青皮PPO粗酶液的最佳提取条件：PVP添加量为1.0%，提取时间4h，料液比为1:3；影响核桃青皮PPO粗酶液提取率的主要因素是提取时间，其次是PVP添加量。2．核桃青皮PPO经过丙酮沉淀、金属螯合亲和层析后，纯化了1.42倍，回收率为0.23%。通过Native-PAGE电泳的方法对提纯的PPO进行纯度鉴定，发现核桃青皮PPO有3种同工酶。3．对核桃青皮PPO的酶学性质进行了初步研究。以邻苯二酚为底物，研究了pH、温度、抑制剂、Cu2+对其活性的影响以及PPO的热稳定性等。研究结果显示，核桃青皮PPO的最适pH是6.0，最适温度是20℃，抗坏血酸对其抑制作用比较显着；亚硫酸氢钠和柠檬酸对核桃青皮PPO的活性也有抑制作用，前者的抑制作用强于后者，当浓度小于10mmol/L的时候，柠檬酸对PPO几乎没有抑制效果。铜离子只有在一定的浓度范围内，才对PPO有激活作用，超过了这个范围，铜离子对PPO反而有抑制作用。
二、乌贼墨多酚氧化酶的部分特性（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、乌贼墨多酚氧化酶的部分特性（论文提纲范文）
（1）DHPM处理和Salecan添加量对低盐条件下肌原纤维蛋白理化特性和结构的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第1章 前言 |
| 1.1 肌原纤维蛋白简述 |
| 1.1.1 肌原纤维蛋白的组成 |
| 1.1.2 肌原纤维蛋白的功能特性 |
| 1.2 改善低盐下肌原纤维蛋白特性的研究 |
| 1.2.1 肌原纤维蛋白的应用限制 |
| 1.2.2 提升低盐下肌原纤维蛋白功能特性的方法 |
| 1.2.2.1 添加外源物-氨基酸 |
| 1.2.2.2 糖基化 |
| 1.2.2.3 酶法 |
| 1.2.2.4 加工新技术 |
| 1.3 DHPM在食品中的应用 |
| 1.3.1 DHPM的发展和作用机理 |
| 1.3.2 DHPM在食品中应用 |
| 1.3.3 DHPM在大分子改性方面的应用。 |
| 1.4 食品体系中蛋白和多糖相互作用 |
| 1.5 课题内容 |
| 1.5.1 研究的目的及意义 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 1.5.3 技术路线 |
| 第2章 Salecan添加量对DHPM条件下低盐肌原纤维蛋白理化特性的影响 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验原料 |
| 2.1.2 试验试剂 |
| 2.1.3 试验设备 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 肌原纤维蛋白的提取 |
| 2.2.2 肌原纤维蛋白浓度测定 |
| 2.2.3 DHPM处理 |
| 2.2.4 溶解度的测定 |
| 2.2.5 表面疏水性的测定 |
| 2.2.6 活性巯基含量的测定 |
| 2.2.7 粒径和zeta-电位的测定 |
| 2.2.8 流变性质的测定 |
| 2.2.9 数据处理 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 Salecan添加量对DHPM条件下低盐肌原纤维蛋白溶解度的影响 |
| 2.3.2 Salecan添加量对DHPM条件下低盐肌原纤维蛋白表面疏水性的影响 |
| 2.3.3 Salecan添加量对DHPM条件下低盐肌原纤维蛋白活性巯基含量的影响 |
| 2.3.4 Salecan添加量对DHPM条件下微粒zeta-粒径的影响 |
| 2.3.5 Salecan添加量对DHPM条件下微粒zeta-电位的影响 |
| 2.3.6 Salecan添加量对DHPM条件下低盐肌原纤维蛋白体系流变学特性的影响 |
| 2.4 结论 |
| 第3章 Salecan添加量对DHPM条件下低盐肌原纤维蛋白结构的影响 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 试验原料 |
| 3.1.2 试验试剂 |
| 3.1.3 试验设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 肌原纤维蛋白的提取 |
| 3.2.2 肌原纤维蛋白浓度测定 |
| 3.2.3 DHPM处理 |
| 3.2.4 激光共聚焦显微镜 |
| 3.2.5 SDS-PAGE |
| 3.2.6 内源荧光光谱 |
| 3.2.7 拉曼光谱 |
| 3.2.8 数据处理 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 CLSM分析Salecan添加量对体系微粒大小和分布的影响 |
| 3.3.2 SDS-PAGE分析Salecan添加量对低盐肌原纤维蛋白降解的影响 |
| 3.3.3 内源荧光光谱分析Salecan添加量对低盐肌原纤维蛋白高级结构的影响 |
| 3.3.4 拉曼光谱分析Salecan添加量对低盐肌原纤维蛋白二级结构的影响 |
| 3.4 结论 |
| 第4章 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白理化特性的影响 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.1.1 试验原料 |
| 4.1.2 试验试剂 |
| 4.1.3 试验设备 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 肌原纤维蛋白的提取 |
| 4.2.2 肌原纤维蛋白浓度测定 |
| 4.2.3 DHPM处理 |
| 4.2.4 溶解度的测定 |
| 4.2.5 表面疏水性的测定 |
| 4.2.6 巯基含量的测定 |
| 4.2.7 粒径和zeta-电位的测定 |
| 4.2.8 流变性质的测定 |
| 4.2.9 数据处理 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白溶解度的影响 |
| 4.3.2 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白表面疏水性的影响 |
| 4.3.3 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白活性巯基含量的影响 |
| 4.3.4 DHPM处理对蛋白多糖复合体系微粒zeta-粒径的影响 |
| 4.3.5 DHPM处理对蛋白多糖复合体系微粒zeta-电位的影响 |
| 4.3.6 DHPM处理对蛋白多糖复合体系流变学特性的影响 |
| 4.3.6.1 DHPM处理对体系黏度的影响 |
| 4.3.6.2 DHPM处理对体系剪切力的影响 |
| 4.4 结论 |
| 第5章 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白结构的影响 |
| 5.1 试验材料 |
| 5.1.1 试验原料 |
| 5.1.2 试验试剂 |
| 5.1.3 试验设备 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 肌原纤维蛋白的提取 |
| 5.2.2 肌原纤维蛋白浓度测定 |
| 5.2.3 DHPM处理 |
| 5.2.4 激光共聚焦显微镜 |
| 5.2.5 SDS-PAGE |
| 5.2.6 紫外-可见吸收光谱 |
| 5.2.7 拉曼光谱 |
| 5.2.8 数据处理 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 DHPM处理对复合体系微粒大小和分布的影响 |
| 5.3.2 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白降解的影响 |
| 5.3.3 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白紫外吸收光谱的影响 |
| 5.3.4 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白二级结构的影响 |
| 5.4 结论 |
| 第6章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.1.1 Salecan添加量对DHPM条件下低盐肌原纤维蛋白理化特性的影响 |
| 6.1.2 Salecan添加量对DHPM条件下低盐肌原纤维蛋白结构的影响 |
| 6.1.3 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白理化特性的影响 |
| 6.1.4 DHPM处理对Salecan条件下肌原纤维蛋白结构的影响 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
（2）‘黑柿’果皮色泽形成的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 植物中天然存在的色素物质 |
| 1.2 柿果皮中常见的色素物质 |
| 1.3 植物黑色素的性质与合成研究进展 |
| 1.4 多酚氧化酶 |
| 1.4.1 多酚氧化酶与果蔬褐变研究进展 |
| 1.4.2 PPO基因研究进展 |
| 1.5 逆境胁迫 |
| 1.5.1 高温强光胁迫与植物生长发育研究进展 |
| 1.5.2 植物抵御高温胁迫的机制研究进展 |
| 1.5.3 植物抵御强光胁迫的机制研究进展 |
| 1.6 研究的目的意义和内容 |
| 1.6.1 目的和意义 |
| 1.6.2 主要研究内容 |
| 第二章 柿果皮色素物质含量变化的研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验用试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 柿果实生长发育参数和果皮颜色的测定 |
| 2.2.2 叶绿素的提取和定量 |
| 2.2.3 类胡萝卜素的提取与定量 |
| 2.2.4 酚类化合物的提取与定量 |
| 2.2.5 数据统计与分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 柿果实成熟过程中的形态及发育相关参数变化 |
| 2.3.2 柿果实发育和成熟期间果皮中类胡萝卜素含量变化 |
| 2.3.3 柿果实发育和成熟过程中酚类含量变化 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 柿果实发育成熟过程中类胡萝卜素的积累 |
| 2.4.2 ‘黑柿’果皮呈黑色与花青素无关 |
| 小结 |
| 第三章 ‘黑柿’果皮黑色素鉴定及其性质的初步研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 试验材料与试剂 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 ‘黑柿’果皮的显微观察 |
| 3.2.2 ‘黑柿’果皮黑色素的分离 |
| 3.2.3 ‘黑柿’果皮黑色素的超微结构观察 |
| 3.2.4 ‘黑柿’果皮黑色素的可溶性、析出与氧化反应 |
| 3.2.5 ‘黑柿’果皮黑色素的紫外-可见吸收光谱分析 |
| 3.2.6 ‘黑柿’果皮黑色素的FT-IR分析 |
| 3.2.7 ‘黑柿’果皮黑色素的抗氧化能力分析 |
| 3.2.8 ‘黑柿’果皮黑色素的抑菌能力分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 ‘黑柿’果皮的显微观察 |
| 3.3.2 ‘黑柿’果皮提取物的扫描电镜观察 |
| 3.3.3 ‘黑柿’果皮提取物的溶解性、氧化和析出反应 |
| 3.3.4 ‘黑柿’果皮黑色素的紫外-可见光谱分析 |
| 3.3.5 ‘黑柿’果皮黑色素的傅里叶变换红外光谱分析 |
| 3.3.6 ‘黑柿’果皮黑色素的抗氧化能力 |
| 3.3.7 ‘黑柿’果皮黑色素对灰葡萄孢生长的体外抑制作用 |
| 小结 |
| 第四章 PPO基因促进‘黑柿’果皮黑色素合成的功能研究 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试剂与培养基配制 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 柿DNA提取 |
| 4.2.2 柿RNA提取 |
| 4.2.3 柿cDNA合成 |
| 4.2.4 柿多酚氧化酶基因片段的克隆 |
| 4.2.5 连接产物转化DH5α |
| 4.2.6 重组载体的鉴定与测序 |
| 4.2.7 GV3101感受态制备和转化 |
| 4.2.8 转化GV3101感受态细胞 |
| 4.2.9 DH5a感受态的制备 |
| 4.2.10 BL21感受态的制备与转化 |
| 4.2.11 柿PPO基因生物信息学分析 |
| 4.2.12 植物过表达载体的构建与转化 |
| 4.2.13 病毒诱导的基因沉默载体的构建与转化 |
| 4.2.14 原核表达载体的构建与转化 |
| 4.2.15 柿多酚氧化酶基因启动子的克隆 |
| 4.2.16 启动子的生物信息学分析 |
| 4.2.17 DkPPO的定量表达分析 |
| 4.2.18 DkPPO在大肠杆菌中的异源表达 |
| 4.2.19 DkPPO的同源过表达分析 |
| 4.2.20 病毒诱导的基因沉默 |
| 4.2.21 PPO酶活性分析 |
| 4.2.22 紫外-可见分光光谱分析 |
| 4.2.23 傅里叶变换红外光谱分析 |
| 4.2.24 数据处理 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 PPO活性与基因表达分析 |
| 4.3.2 DkPPO的克隆和序列分析 |
| 4.3.3 ‘黑柿’PPO的功能分析 |
| 4.3.4 ‘黑柿’多酚氧化酶基因启动子的生物信息学分析 |
| 小结 |
| 第五章 强光胁迫抑制‘黑柿’果皮黑色素合成的机制研究 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 植物材料 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 过氧化物含量分析 |
| 5.2.2 叶绿素含量提取与分析 |
| 5.2.3 叶绿素光合参数分析 |
| 5.2.4 叶绿体超微结构观察 |
| 5.2.5 酚类化合物的提取与分析 |
| 5.2.6 类胡萝卜素的提取与分析 |
| 5.2.7 有机酸含量分析 |
| 5.2.8 糖组分含量分析 |
| 5.2.9 多酚氧化酶活性分析 |
| 5.2.10 柿转录组学分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 强光胁迫抑制‘黑柿’果皮黑色素合成 |
| 5.3.2 强光胁迫对果皮中酚类化合物含量的影响 |
| 5.3.3 强光胁迫对柿果皮中类胡萝卜素含量的影响 |
| 5.3.4 强光胁迫对柿果皮中有机酸和糖含量的影响 |
| 5.3.5 强光胁迫对柿果皮中多酚氧化酶活性与基因表达的影响 |
| 5.3.6 强光胁迫和正常柿果皮的转录组学结果分析 |
| 5.4 讨论 |
| 小结 |
| 第六章 结论与创新 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）灰褐牛肝菌（Boletus griseus）黑色素制备、结构分析及其益生元活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 灰褐牛肝菌的概述 |
| 1.2 黑色素的概述 |
| 1.2.1 黑色素的简介 |
| 1.3 天然黑色素的来源 |
| 1.3.1 动物来源黑色素 |
| 1.3.2 植物来源黑色素 |
| 1.3.3 微生物来源黑色素 |
| 1.4 黑色素的合成途径 |
| 1.5 黑色素的性质 |
| 1.5.1 黑色素的理化性质 |
| 1.5.2 黑色素的生物活性 |
| 1.6 黑色素的提取纯化方法 |
| 1.6.1 水洗法提取黑色素 |
| 1.6.2 碱溶酸沉法提取黑色素 |
| 1.6.3 酶法提取黑色素 |
| 1.6.4 分级分离法提取黑色素 |
| 1.7 黑色素的结构 |
| 1.7.1 黑色素的结构 |
| 1.7.2 黑色素的结构解析方法 |
| 1.8 黑色素的应用 |
| 1.9 肠道健康 |
| 1.9.1 益生菌与肠道健康 |
| 1.9.2 肠道发酵 |
| 1.9.3 益生元 |
| 1.9.4 短链脂肪酸 |
| 1.10 研究内容、科学意义和创新点 |
| 1.10.1 研究内容 |
| 1.10.2 科学意义 |
| 1.10.3 创新点 |
| 第二章 灰褐牛肝菌黑色素提取纯化及基本性质研究 |
| 2.1 材料与试剂 |
| 2.1.1 灰褐牛肝菌采集与预处理 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.2 实验仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 黑色素提取 |
| 2.3.2 黑色素纯化 |
| 2.3.3黑色素验证实验 |
| 2.3.4黑色素溶解性实验 |
| 2.3.5 黑色素的紫外-可见光谱扫描 |
| 2.3.6 黑色素的色价测定 |
| 2.4 数据处理与分析 |
| 2.5 结果与讨论 |
| 2.5.1 灰褐牛肝菌黑色素制取 |
| 2.5.2 黑色素的验证 |
| 2.5.3黑色素溶解性实验 |
| 2.5.4 黑色素的紫外-可见光谱扫描 |
| 2.5.5 黑色素的色价 |
| 2.6 本章小结 |
| 第三章 灰褐牛肝菌黑色素的结构解析 |
| 3.1 材料与试剂 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.2 实验仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 黑色素的场发射扫描电镜分析 |
| 3.3.2 元素分析 |
| 3.3.3 红外光谱分析 |
| 3.3.4 核磁共振1H谱和13C谱分析 |
| 3.3.5 热解-气相质谱联用分析 |
| 3.3.6 超高效液相色谱高分辨质谱联用分析 |
| 3.4 数据处理和分析 |
| 3.5 结果与讨论 |
| 3.5.1 黑色素的场发射扫描电镜分析 |
| 3.5.2 元素分析 |
| 3.5.3 红外光谱分析 |
| 3.5.4 核磁共振1H谱和13C谱分析 |
| 3.5.5 热解-GC/MS分析 |
| 3.5.6 超高效液相色谱高分辨质谱联用分析 |
| 3.5.7 灰褐牛肝菌黑色素BgM结构分析 |
| 3.6 本章小结 |
| 第四章 灰褐牛肝菌黑色素降解产物的制取及分析 |
| 4.1 实验材料与试剂 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验试剂 |
| 4.2 实验仪器与设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 黑色素氧化降解 |
| 4.3.2 降解产物溶解性 |
| 4.3.3 高效液相色谱分析降解产物分子量 |
| 4.3.4 降解产物热解-GC/MS分析 |
| 4.3.5 降解产物光谱学特性分析 |
| 4.4 数据处理与分析 |
| 4.5 结果与讨论 |
| 4.5.1 黑色素降解产物 |
| 4.5.2 降解产物溶解性分析 |
| 4.5.3 降解产物分子量分析 |
| 4.5.4 热解-GC/MS分析 |
| 4.5.5 降解产物的光谱学特性 |
| 4.6 本章小结 |
| 第五章 灰褐牛肝菌黑色素对益生菌的作用 |
| 5.1 实验材料与试剂 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 实验试剂 |
| 5.2 实验仪器与设备 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 灰褐牛肝菌黑色素预处理 |
| 5.3.2 体外模拟胃肠消化 |
| 5.3.3 体外模拟肠道发酵 |
| 5.3.4 益生菌数量的测定 |
| 5.3.5 短链脂肪酸的测定 |
| 5.4 实验数据处理与分析 |
| 5.5 结果与讨论 |
| 5.5.1 灰褐牛肝菌黑色素对益生菌数量的影响 |
| 5.5.2 灰褐牛肝菌黑色素发酵产短链脂肪酸的变化 |
| 5.6 本章小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（4）六堡茶多酚氧化酶及其产生菌对茶叶品质的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 导论 |
| 1.1 六堡茶概述 |
| 1.2 黑茶成分及其渥堆发酵过程中的变化 |
| 1.2.1 茶多酚 |
| 1.2.2 茶色素 |
| 1.2.3 游离氨基酸 |
| 1.2.4 水浸出物 |
| 1.3 黑茶微生物的研究现状 |
| 1.3.1 微生物在黑茶发酵过程的作用 |
| 1.3.2 六堡茶中微生物的研究进展 |
| 1.3.3 茶叶产多酚氧化酶菌株 |
| 1.4 多酚氧化酶概述 |
| 1.4.1 多酚氧化酶的分类 |
| 1.4.2 多酚氧化酶的分离与纯化 |
| 1.4.3 多酚氧化酶的物种特异性和酶学特性 |
| 1.4.4 茶叶加工中多酚氧化酶的应用 |
| 1.4.5 黑茶中产多酚氧化酶微生物的相关研究 |
| 1.4.6 多酚氧化酶的新技术 |
| 1.5 研究目的、意义和内容 |
| 1.5.1 研究目的 |
| 1.5.2 研究意义 |
| 1.5.3 研究内容 |
| 第二章 六堡茶渥堆时期多酚氧化酶和茶叶品质成分的变化 |
| 2.1 实验材料来源、仪器设备及主要试剂 |
| 2.1.1 实验材料来源与保存 |
| 2.1.2 仪器设备 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 茶叶多酚氧化酶的提取与测定 |
| 2.2.2 茶叶可溶性蛋白质的测定 |
| 2.2.3 茶多酚含量的测定 |
| 2.2.4 茶色素含量的测定 |
| 2.2.5 茶叶游离氨基酸的测定 |
| 2.2.6 茶叶水分活度、含水率的测定 |
| 2.2.7 茶叶水浸出物的测定 |
| 2.2.8 茶汤色度的测定 |
| 2.2.9 茶叶微生物数量的测定 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 六堡茶多酚氧化酶酶活及可溶性蛋白质的变化 |
| 2.3.2 六堡茶渥堆时期茶多酚含量的变化 |
| 2.3.3 六堡茶渥堆时期游离氨基酸含量的变化 |
| 2.3.4 六堡茶渥堆时期水分活度和含水率的变化 |
| 2.3.5 六堡茶渥堆时期水浸出物含量的变化 |
| 2.3.6 六堡茶渥堆时期茶汤色度及茶色素的变化 |
| 2.3.7 渥堆时期微生物类群的数量变化 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 六堡茶多酚氧化酶同工酶的分离鉴定及酶学性质 |
| 3.1 实验原料、仪器设备及主要试剂 |
| 3.1.1 实验原料 |
| 3.1.2 仪器设备 |
| 3.1.3 主要试剂 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 茶叶多酚氧化酶的提取优化 |
| 3.2.2 茶叶多酚氧化酶的分离纯化 |
| 3.2.3 同工酶酶学特性的研究 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 六堡茶多酚氧化酶粗酶液的提取优化 |
| 3.3.2 六堡茶多酚氧化酶的分离与纯化 |
| 3.3.3 六堡茶多酚氧化酶同工酶的酶学性质 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 六堡茶嗜热菌的鉴定与多酚氧化酶产生菌的筛选 |
| 4.1 实验材料、仪器和主要试剂 |
| 4.1.1 实验原料 |
| 4.1.2 主要仪器 |
| 4.1.3 实验试剂 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 六堡茶嗜热菌的分离 |
| 4.2.2 嗜热菌的分子学鉴定 |
| 4.2.3 产多酚氧化酶的嗜热菌筛选 |
| 4.2.4 产多酚氧化酶菌株的产酶活力曲线绘制 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 六堡茶渥堆过程中嗜热菌的分子学鉴定结果 |
| 4.3.2 产多酚氧化酶的嗜热菌筛选 |
| 4.3.3 多酚氧化酶产生菌的产酶活力曲线绘制 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 多酚氧化酶产生菌对茶叶的固体发酵应用 |
| 5.1 实验原料、仪器、试剂 |
| 5.1.1 实验原料 |
| 5.1.2 实验仪器 |
| 5.1.3 实验试剂 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 产多酚氧化酶菌株粗酶液对茶汤的转化作用 |
| 5.2.2 产多酚氧化酶菌株固体发酵应用 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 产多酚氧化酶菌株粗酶液对茶汤的转化作用 |
| 5.3.2 固体发酵模拟实验多酚氧化酶酶活的测定 |
| 5.3.3 固体发酵模拟实验茶多酚含量的测定 |
| 5.3.4 固体发酵模拟实验茶色素含量的测定 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 全文总结 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）菠萝皮渣纤维素基水凝胶的制备、表征及其性能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 农产品加工废弃物的综合利用概括 |
| 1.2 菠萝加工废弃物的综合利用概括 |
| 1.2.1 菠萝简介 |
| 1.2.2 菠萝皮渣的综合利用概述 |
| 1.2.2.1 菠萝蛋白酶 |
| 1.2.2.2 生物活性物质领域 |
| 1.2.2.3 清洁能源生产领域 |
| 1.2.2.4 材料领域 |
| 1.2.2.5 饲料领域 |
| 1.2.2.6 食品领域 |
| 1.3 纤维素研究进展 |
| 1.3.1 纤维素结构 |
| 1.3.2 纤维素溶剂 |
| 1.3.2.1 无机溶剂体系 |
| 1.3.2.2 有机溶剂体系 |
| 1.3.2.3 离子液体体系 |
| 1.3.3 纤维素改性 |
| 1.3.3.1 化学改性 |
| 1.3.3.2 物理改性 |
| 1.3.3.3 生物改性 |
| 1.4 水凝胶的研究进展 |
| 1.4.1 智能水凝胶 |
| 1.4.1.1 pH敏感性水凝胶 |
| 1.4.1.2 温度敏感性水凝胶 |
| 1.4.1.3 电场敏感性水凝胶 |
| 1.4.1.4 磁场敏感性水凝胶 |
| 1.4.1.5 盐敏感性水凝胶 |
| 1.4.1.6 其它智能响应性水凝胶 |
| 1.4.2 水凝胶的应用 |
| 1.4.2.1 在医学领域方面的应用 |
| 1.4.2.2 在污水处理方面的应用 |
| 1.4.2.3 在农业领域方面的应用 |
| 1.4.2.4 在固定化酶和催化剂方面的应用 |
| 1.5 本文研究的内容及意义 |
| 第二章 离子液体中菠萝皮渣纤维素乙酰化改性及负载乌贼墨水凝胶的制备 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 仪器与设备 |
| 2.2.3 纤维素的提取 |
| 2.2.4 乌贼墨的预处理 |
| 2.2.5 水凝胶的制备方法 |
| 2.2.6 结构表征 |
| 2.2.6.1 红外光谱（FTIR）表征 |
| 2.2.6.2 X射线衍射（XRD）表征 |
| 2.6.2.3 扫描电镜（SEM）观察 |
| 2.2.6.4 热稳定性分析（TG-DSC） |
| 2.2.7 水凝胶吸附亚甲基蓝性能测定 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 FTIR分析 |
| 2.3.2 XRD分析 |
| 2.3.3 SEM分析 |
| 2.3.4 TG-DSC分析 |
| 2.3.5 吸附亚甲基蓝动力学分析 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 离子液体中菠萝皮渣纤维素接枝丙烯酸及负载乌贼墨和高岭土水凝胶的制备 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 仪器与设备 |
| 3.2.3 乌贼墨的预处理 |
| 3.2.4 水凝胶的制备方法 |
| 3.2.5 结构表征 |
| 3.2.5.1 FTIR表征 |
| 3.2.5.2 XRD表征 |
| 3.2.5.3 SEM表征 |
| 3.2.5.4 热稳定性分析（TG-DSC） |
| 3.2.6 水凝胶的溶胀性能测定 |
| 3.2.7 水凝胶的p H响应性测定 |
| 3.2.8 水凝胶吸附亚甲基蓝性能测定 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.0 水凝胶形成机制 |
| 3.3.1 FTIR分析 |
| 3.3.2 XRD分析 |
| 3.3.3 SEM分析 |
| 3.3.4 TG-DSC分析 |
| 3.3.5 溶胀动力学分析 |
| 3.3.6 pH敏感性分析 |
| 3.3.7 吸附亚甲基蓝性能分析 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 菠萝皮渣羧甲基纤维素基超吸水智能水凝胶的制备及溶胀特性研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 仪器与设备 |
| 4.2.3 羧甲基纤维素的制备 |
| 4.2.4 水凝胶的制备 |
| 4.2.5 结构表征 |
| 4.2.5.1 FTIR表征 |
| 4.2.5.2 XRD表征 |
| 4.2.5.3 SEM分析 |
| 4.2.6 水凝胶的溶胀性能测定 |
| 4.2.7 水凝胶的pH响应性测定 |
| 4.2.8 水凝胶的盐敏感性测定 |
| 4.2.9 水凝胶的溶剂敏感性测定 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 水凝胶的形成机制 |
| 4.3.2 FTIR分析 |
| 4.3.3 XRD分析 |
| 4.3.4 SEM分析 |
| 4.3.5 溶胀性能分析 |
| 4.3.6 pH敏感性分析 |
| 4.3.7 盐敏感性分析 |
| 4.3.8 溶剂敏感性分析 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 菠萝皮渣羧甲基纤维素/海藻酸钠/明胶多重响应复合水凝胶的制备及特性研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 材料与试剂 |
| 5.2.2 仪器与设备 |
| 5.2.3 水凝胶的制备方法 |
| 5.2.4 结构表征 |
| 5.2.4.1 FTIR表征 |
| 5.2.4.2 XRD表征 |
| 5.2.4.3 SEM分析 |
| 5.2.5 溶胀动力学 |
| 5.2.6 水凝胶的pH响应性测定 |
| 5.2.7 水凝胶的盐敏感性测定 |
| 5.2.8 水凝胶的电场敏感性测定 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 FTIR分析 |
| 5.3.2 XRD分析 |
| 5.3.3 SEM分析 |
| 5.3.4 溶胀性能分析 |
| 5.3.5 盐敏感性分析 |
| 5.3.6 pH敏感性分析 |
| 5.3.7 电场敏感性分析 |
| 5.3.7.1 水凝胶电场敏感性机理 |
| 5.3.7.2 离子强度对电场弯曲行为的影响 |
| 5.3.7.3 pH值对电场弯曲行为的影响 |
| 5.3.7.4 电场强度对电场弯曲行为的影响 |
| 5.3.7.5 可逆弯曲行为研究 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 菠萝皮渣羧甲基纤维素/聚乙烯醇/SBA-15 复合水凝胶的制备及固定化酶应用 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.2.1 材料与试剂 |
| 6.2.2 仪器与设备 |
| 6.2.3 水凝胶的制备方法 |
| 6.2.4 结构表征 |
| 6.2.4.1 FTIR表征 |
| 6.2.4.2 XRD表征 |
| 6.2.4.3 热稳定性分析（TG-DSC） |
| 6.2.4.4 SEM分析 |
| 6.2.5 木瓜蛋白酶的固定化 |
| 6.2.6 木瓜蛋白酶活性测定 |
| 6.2.7 固定化木瓜蛋白酶的p H敏感性 |
| 6.2.8 固定化木瓜蛋白酶的温度、p H和储存稳定性 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.3.1 FTIR分析 |
| 6.3.2 XRD分析 |
| 6.3.3 TG-DSC分析 |
| 6.3.4 SEM分析 |
| 6.3.5 水凝胶制备参数对固定化木瓜蛋白酶活力的影响 |
| 6.3.6 木瓜蛋白酶固定化条件优化 |
| 6.3.6.1 酶浓度对固定化酶活力的影响 |
| 6.3.6.2 p H对固定化酶活力的影响 |
| 6.3.6.3 戊二醛浓度对固定化酶活力的影响 |
| 6.3.6.4 交联时间对固定化酶活力的影响 |
| 6.3.7 固定化木瓜蛋白酶的p H敏感性 |
| 6.3.8 固定化木瓜蛋白酶的p H和温度稳定性 |
| 6.3.9 固定化木瓜蛋白酶的储存稳定性 |
| 6.4 本章小结 |
| 第七章 菠萝皮渣羧甲基纤维素/聚乙烯醇/氧化石墨烯/皂土水凝胶的制备及吸附亚甲基蓝应用 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 材料与方法 |
| 7.2.1 材料与试剂 |
| 7.2.2 仪器与设备 |
| 7.2.3 水凝胶的制备方法 |
| 7.2.4 结构表征 |
| 7.2.4.1 FTIR表征 |
| 7.2.4.2 XRD表征 |
| 7.2.4.3 热稳定性分析（TG-DSC） |
| 7.2.4.4 SEM分析 |
| 7.2.5 水凝胶的溶胀和p H敏感性 |
| 7.2.6 水凝胶对亚甲基蓝吸附测定 |
| 7.2.6.1 亚甲基蓝吸附动力学 |
| 7.2.6.2 p H值对吸附性能的影响 |
| 7.2.6.3 亚甲基蓝溶液浓度对吸附性能的影响 |
| 7.2.6.4 水凝胶吸附亚甲基蓝的重复使用性能测定 |
| 7.3 结果与讨论 |
| 7.3.1 FTIR分析 |
| 7.3.2 XRD分析 |
| 7.3.3 SEM分析 |
| 7.3.4 热稳定性分析 |
| 7.3.5 溶胀性能和p H敏感性分析 |
| 7.3.6 水凝胶对亚甲基蓝的吸附性能分析 |
| 7.3.6.1 在不同温度下的吸附动力学 |
| 7.3.6.2 p H值对吸附能力的影响 |
| 7.3.6.3 亚甲基蓝溶液浓度对吸附能力的影响 |
| 7.3.6.4 水凝胶吸附亚甲基蓝重复使用性能分析 |
| 7.3.6.5 水凝胶吸附亚甲基效果图 |
| 7.3.6.6 吸附等温线 |
| 7.4 本章小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 附录 |
（6）南海鸢乌贼墨汁多糖分离纯化与活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 引言 |
| 1.1 乌贼墨来源及理化性质 |
| 1.1.1 乌贼墨来源 |
| 1.1.2 乌贼墨理化性质 |
| 1.2 乌贼墨汁多糖理化性质 |
| 1.3 乌贼墨汁多糖提取 |
| 1.4 乌贼墨汁多糖分离纯化 |
| 1.4.1 除蛋白质 |
| 1.4.2 除色素 |
| 1.4.3 乌贼墨汁多糖纯化 |
| 1.5 多糖的生物活性 |
| 1.5.1 抗氧化及防腐保鲜作用 |
| 1.5.2 免疫调节及抗肿瘤作用 |
| 1.6 研究意义和主要内容 |
| 1.6.1 研究意义 |
| 1.6.2 主要内容 |
| 第二章 南海鸢乌贼墨汁营养成分分析与评价 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料、试剂与仪器 |
| 2.2.1 实验材料和试剂 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 一般营养成分的测定 |
| 2.3.2 氨基酸的测定 |
| 2.3.3 脂肪酸的测定 |
| 2.3.4 各矿物元素质量分数的测定 |
| 2.3.5 维生素质量分数的测定 |
| 2.4 营养价值的评定 |
| 2.5 结果与分析 |
| 2.5.1 一般营养成分分析 |
| 2.5.2 氨基酸组成、质量分数及营养评价 |
| 2.5.3 脂肪酸的组成及质量分数 |
| 2.5.4 矿物元素和维生素质量分数 |
| 2.6 本章小结 |
| 第三章 响应面法优化南海鸢乌贼墨汁多糖提取工艺 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料、试剂与仪器 |
| 3.2.1 实验材料和试剂 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 南海鸢乌贼墨多糖提取工艺流程 |
| 3.3.2 多糖含量的测定 苯酚硫酸法 |
| 3.3.3 蛋白含量的测定 考马斯亮蓝法 |
| 3.3.4 鸢乌贼墨汁多糖提取率的计算 |
| 3.3.5 单因素试验 |
| 3.3.6 响应面试验设计 |
| 3.3.7 数据分析 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 多糖含量测定 |
| 3.4.2 单因素实验 |
| 3.4.3 响应面分析 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 南海鸢乌贼墨汁多糖分离纯化及组分分析 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料、试剂与仪器 |
| 4.2.1 实验材料和试剂 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 鸢乌贼墨汁多糖的分离纯化 |
| 4.3.2 红外光谱分析 |
| 4.3.3 单糖组分的分析方法-PMP衍生高效液相法 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 固相萃取小柱层析结果分析 |
| 4.4.2 离子交换柱层析结果分析 |
| 4.4.3 分子筛层析结果分析 |
| 4.4.4 红外光谱结果分析 |
| 4.4.5 单糖组分分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 南海鸢乌贼墨多糖抗菌、抗氧化、防腐保鲜活性探究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料、试剂与仪器 |
| 5.2.1 实验材料和试剂 |
| 5.2.2 实验仪器 |
| 5.3 试验方法 |
| 5.3.1 墨多糖SIP1组分的抗菌作用 |
| 5.3.2 墨多糖SIP1组分的体外抗氧化作用 |
| 5.3.3 墨多糖SIP1组分对罗非鱼片的防腐保鲜作用 |
| 5.4 结果与分析 |
| 5.4.1 抗菌作用分析 |
| 5.4.2 墨多糖组分SIP1体外抗氧化作用分析 |
| 5.4.3 墨多糖组分SIP1对罗非鱼片的防腐保鲜作用 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 硕士攻读期间论文成果 |
（7）海洋头足类墨汁中活性成分的研究进展（论文提纲范文）
| 1 头足类墨汁中的主要活性物质 |
| 1.1 黑色素 |
| 1.1.1 结构 |
| 1.1.2 活性 |
| 1.1.3 提取方法 |
| 1.2 多糖类物质 |
| 1.2.1 结构 |
| 1.2.2 活性 |
| 1.2.3 提取方法 |
| 1.3 肽类物质 |
| 1.3.1 结构 |
| 1.3.2 活性 |
| 1.3.3 提取方法 |
| 1.4 酶类物质 |
| 2 墨汁中其他活性成分及营养成分 |
| 3 展望 |
（8）中间气单胞菌WS菌株黑色素合成调控研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 黑色素概述 |
| 1.1.1 黑色素的概念 |
| 1.1.2 黑色素的分类 |
| 1.1.3 黑色素的特性及鉴定特征 |
| 1.1.4 黑色素的功能研究 |
| 1.2 黑色素的合成调控 |
| 1.2.1 多巴黑色素合成相关酶类 |
| 1.2.2 尿黑酸黑色素合成相关酶类 |
| 1.2.3 DHN黑色素合成相关酶类 |
| 1.3 基因组学及功能基因组学 |
| 1.3.1 基因组学 |
| 1.3.2 功能基因组学 |
| 1.3.3 基因敲除技术 |
| 1.4 本研究的目的和意义 |
| 第二章 中间气单胞菌WS菌株中TyrA的后续研究及遗传操作平台的构建 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 菌株与质粒 |
| 2.1.2 药品试剂及仪器 |
| 2.1.3 溶液与培养基的配制 |
| 2.1.4 引物 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 定点突变株的构建 |
| 2.2.2 酪氨酸酶的酶活检测 |
| 2.2.3 细菌酪氨酸酶的异源表达与纯化 |
| 2.2.4 重组酪氨酸酶的功能鉴定 |
| 2.2.5 遗传标记的筛选 |
| 2.2.6 缺失株的构建与筛选 |
| 2.2.7 缺失株的鉴定与功能检测 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 TyrA的组氨酸突变及突变株酶活检测 |
| 2.3.2 细菌酪氨酸酶的异源表达与纯化 |
| 2.3.3 气单胞菌遗传标记的筛选 |
| 2.3.4 WS菌株中melA基因的敲除鉴定 |
| 2.4 讨论与小结 |
| 第三章 中间气单胞菌WS菌株全基因组测序及分析 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 菌株与质粒 |
| 3.1.2 药品试剂与仪器 |
| 3.1.3 基因组研究的数据库及分析软件 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 WS菌株黑色素相关基因的文库 |
| 3.2.2 文库中突变基因的鉴定 |
| 3.2.3 基因组的提取与检测 |
| 3.2.4 基因组测序 |
| 3.2.5 基因组预测 |
| 3.2.6 基因组信息学分析 |
| 3.2.7 基因组中黑色素代谢通路的信息学分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 WS菌株黑色素代谢基因文库的建立 |
| 3.3.2 中间气单胞菌WS菌株基因组特征 |
| 3.3.3 中间气单胞菌WS菌株基因组信息学分析 |
| 3.3.4 WS菌株黑色素合成的代谢通路分析 |
| 3.3.5 WS菌株基因组中色素合成的GO功能分类分析 |
| 3.4 讨论与小结 |
| 第四章 中间气单胞菌WS菌株中L-DOPA黑色素合成途径研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 菌株与质粒 |
| 4.1.2 药品试剂与仪器 |
| 4.1.3 引物 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 HPLC检测中间代谢产物L-DOPA |
| 4.2.2 黑色素的提取纯化 |
| 4.2.3 黑色素的性质鉴定 |
| 4.2.4 WS菌株L-DOPA催化活性的多酚氧化酶的检测 |
| 4.2.5 yfiH突变株的构建与功能鉴定 |
| 4.2.6 蛋白质液质联用质谱 |
| 4.2.7 katE的缺失与回补 |
| 4.2.8 CAT活性测定 |
| 4.2.9 大肠杆菌中katE同源基因hpii的敲除 |
| 4.2.10 CAT与Hpii异源表达产物的纯化及功能鉴定 |
| 4.2.11 胞内ROS的测定 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 WS菌株L-DOPA中间产物的检测 |
| 4.3.2 WS菌株黑色素的性质 |
| 4.3.3 WS菌株中黑色素合成的L-DOPA途径 |
| 4.3.4 漆酶类似蛋白YfiH的功能检测 |
| 4.3.5 PPO2的质谱鉴定与分析 |
| 4.3.6 过氧化氢酶CAT缺失菌株与回补菌株的PPO活性检测 |
| 4.3.7 过氧化氢酶的CAT活性检测 |
| 4.3.8 KatE结构域蛋白CAT和Hpii的异源表达纯化产物鉴定 |
| 4.3.9 WS菌株中多酚氧化酶与黑色素合成相关性研究 |
| 4.3.10 过氧化氢酶的CAT活性在黑色素合成过程中的作用 |
| 4.4 讨论与小结 |
| 研究总结和展望 |
| 参考文献 |
| 研究生期间科研成果 |
| 致谢 |
（9）八棱海棠（Malus robusta）两个多酚氧化酶基因的克隆及降解酚类化合物的初步功能鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 多酚氧化酶概况及酚类降解的研究进展 |
| 1 多酚氧化酶的概况 |
| 1.1 多酚氧化酶的分布 |
| 1.2 多酚氧化酶的性质 |
| 1.3 多酚氧化酶机理研究 |
| 1.4 多酚氧化酶的功能研究 |
| 1.5 多酚氧化酶基因的研究进展 |
| 2 环境污染 |
| 2.1 环境污染的现状 |
| 2.2 环境治理方法 |
| 3 酚类化合物治理的研究现状 |
| 3.1 化学法对酚类化合物的治理 |
| 3.2 物理法对酚类化合物的治理 |
| 3.3 生物法对酚类化合物的治理 |
| 4 本课题研究的目的及其内容 |
| 4.1 本课题研究的目的 |
| 4.2 研究内容 |
| 5 本研究的技术路线 |
| 第二章 八棱海棠MDPPO2B、MDPPO3B基因的克隆与生物信息学分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 克隆及测序 |
| 1.3 基因的改造 |
| 1.4 序列测定 |
| 1.5 DNA序列相似性用DNAman软件比对 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 MdPPO2B、MdPPO3B基因的克隆 |
| 2.2 MdPPO2B、MdPPO3B基因的序列分析 |
| 2.3 MdPPO2B、MdPPO3B一级结构分析 |
| 2.4 MdPPO2B、MdPPO3B二级和三级结构分析 |
| 3 讨论 |
| 第三章 八棱海棠PPO的甲醇酵母分泌表达和纯化 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 载体pPIC9K连接 |
| 2.2 阳性克隆子的筛选 |
| 2.3 电泳验证和蛋白定量 |
| 3 讨论 |
| 第四章 八棱海棠多酚氧化酶酶学性质 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 八棱海棠PPO最适pH值 |
| 2.2 八棱海棠PPO最适温度和热稳定性 |
| 2.3 金属离子和抑制剂对八棱海棠PPO活力的影响 |
| 2.4 PPO两种底物的酶学动力参数 |
| 3 讨论 |
| 第五章 八棱海棠MdPPO2B、MdPPO3B基因提高拟南芥对酚类物质的抗性 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 MdPPO2B、MdPPO3B农杆菌双元载体建立 |
| 2.2 转基因植株的筛选 |
| 2.3 转基因植株PCR检测 |
| 2.4 转基因植株在含有酚类平板上的抗性观察 |
| 2.5 转基因植株在含有酚类土壤中的苯酚抗性观察 |
| 2.6 转基因植株在液体培养系统中的苯酚抗性观察 |
| 3 讨论 |
| 全文结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 博士期间发表文章 |
| 致谢 |
（10）核桃青皮PPO的分离纯化及部分酶学性质研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 多酚氧化酶的国内外研究现状 |
| 1.1.1 多酚氧化酶在植物体内的分布与定位 |
| 1.1.2 多酚氧化酶的作用机理 |
| 1.1.3 多酚氧化酶的分子结构 |
| 1.1.4 多酚氧化酶的分子量 |
| 1.1.5 多酚氧化酶的生理功能 |
| 1.1.6 影响植物中 PPO 活性的因素 |
| 1.2 金属螯合亲和层析 |
| 1.2.1 作用机理 |
| 1.2.2 金属螯合亲和层析柱的制法 |
| 1.2.3 金属螯合亲和层析的优点 |
| 1.2.4 金属螯合亲和层析的应用 |
| 1.3 论文选题的目的意义和研究内容 |
| 1.3.1 论文选题的目的和意义 |
| 1.3.2 本课题的研究内容 |
| 第2章 核桃青皮 PPO 的分离纯化 |
| 2.1 材料、仪器及试剂 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验仪器 |
| 2.1.3 试验试剂 |
| 2.1.4 缓冲液的配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 核桃青皮 PPO 活性的测定 |
| 2.2.2 蛋白质含量的测定 |
| 2.2.3 PPO 比活力的测定 |
| 2.2.4 PPO 粗酶液提取 |
| 2.2.5 有机溶剂沉淀 |
| 2.2.6 透析 |
| 2.2.7 核桃青皮 PPO 的 Cu2+-DEAE-纤维素柱层析 |
| 2.2.8 PPO 粗酶液提取最适条件的研究 |
| 2.2.9 核桃青皮 PPO 的 Native-PAGE 电泳纯度鉴定 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 核桃青皮 PPO 提取单因素试验 |
| 2.3.2 正交试验 |
| 2.3.3 核桃青皮 PPO 的 Cu~(2+)-DEAE-纤维素柱层析 |
| 2.3.4 核桃青皮 PPO 纯化结果 |
| 2.3.5 核桃青皮 PPO 的 Native-PAGE 电泳纯度鉴定 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 核桃青皮 PPO 酶学性质研究 |
| 3.1 材料、试剂及仪器 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试剂 |
| 3.1.3 仪器 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 PPO 反应进程曲线 |
| 3.2.2 pH 对 PPO 活性的影响 |
| 3.2.3 温度对 PPO 活性的影响 |
| 3.2.4 底物浓度对 PPO 活性的影响 |
| 3.2.5 酶浓度对反应速度的影响 |
| 3.2.6 抗坏血酸对 PPO 活性的影响 |
| 3.2.7 亚硫酸氢钠和柠檬酸对 PPO 活性的影响 |
| 3.2.8 Cu~(2+)浓度对 PPO 活性的影响 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 PPO 反应进程曲线 |
| 3.3.2 pH 对 PPO 活性的影响 |
| 3.3.3 温度对 PPO 活性的影响 |
| 3.3.4 底物浓度对 PPO 活性的影响 |
| 3.3.5 酶量对反应速度的影响 |
| 3.3.6 抗坏血酸浓度对 PPO 活性的影响 |
| 3.3.7 亚硫酸氢钠和柠檬酸对 PPO 活性的影响 |
| 3.3.8 Cu~(2+)浓度对 PPO 活性的影响 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 结论与讨论 |
| 4.1 结论 |
| 4.2 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 |
四、乌贼墨多酚氧化酶的部分特性（论文参考文献）
- [1]DHPM处理和Salecan添加量对低盐条件下肌原纤维蛋白理化特性和结构的影响[D]. 吴佳. 西南大学, 2021(01)
- [2]‘黑柿’果皮色泽形成的机制研究[D]. 戚英伟. 西北农林科技大学, 2020(03)
- [3]灰褐牛肝菌（Boletus griseus）黑色素制备、结构分析及其益生元活性研究[D]. 刘秋鸣. 昆明理工大学, 2019(04)
- [4]六堡茶多酚氧化酶及其产生菌对茶叶品质的应用[D]. 胡沛然. 广西大学, 2019(06)
- [5]菠萝皮渣纤维素基水凝胶的制备、表征及其性能研究[D]. 戴宏杰. 华南理工大学, 2018(12)
- [6]南海鸢乌贼墨汁多糖分离纯化与活性研究[D]. 杨丽芝. 上海海洋大学, 2016(04)
- [7]海洋头足类墨汁中活性成分的研究进展[J]. 杨贤庆,杨丽芝,黄卉,李来好,邓建朝,吴燕燕,戚勃. 食品工业科技, 2015(21)
- [8]中间气单胞菌WS菌株黑色素合成调控研究[D]. 柴保中. 武汉大学, 2017(12)
- [9]八棱海棠（Malus robusta）两个多酚氧化酶基因的克隆及降解酚类化合物的初步功能鉴定[D]. 沈雪芳. 南京农业大学, 2015(12)
- [10]核桃青皮PPO的分离纯化及部分酶学性质研究[D]. 王和利. 河南科技大学, 2012(05)