一、两株甜菜夜蛾核型多角体病毒的研究（论文文献综述）
刘志成[1]（2021）在《甜菜夜蛾miR-2763对Se301细胞和甜菜夜蛾核型多角体病毒（SeMNPV）感染的影响》文中研究表明
程露强[2]（2021）在《我国不同地理种群草地贪夜蛾对其核型多角体病毒（SfMNPV）敏感性及影响因子研究》文中研究说明草地贪夜蛾Spodopterafrugiperda是为害玉米等作物的重大害虫,自2018年末入侵我国以来,对玉米等多种作物的产量产生严重威胁。草地贪夜蛾核型多角体病毒Spodoptera frugiperda multiple nucleopolyhedrovirus（SfMNPV）是专一感染草地贪夜蛾的昆虫病毒,制成病毒杀虫剂后,具有无污染、环境友好、持效性长等优势,是化学防治的良好补充。一方面由于目前病毒的生产主要依赖活体宿主繁殖,获取（筛选）对病毒高敏感的宿主昆虫,对提升病毒生产效率,具有重要的意义。另一方面,了解不同地理种群草地贪夜蛾对SfMNPV的敏感性,也能为田间开展SfMNPV药效试验和各地生物防治草地贪夜蛾提供基础。本研究以室内建立的采自云南德宏、广东广州、广西钦州、西藏林芝四个地区草地贪夜蛾种群为实验材料,通过分子标记鉴定技术,确定其基因型;通过生物测定手段,评价各种群对SfMNPV的敏感性;最后以高敏感的西藏种群和低敏感的广西钦州种群为研究对象,比较两者差异,初步探索不同地理种群敏感性差异的原因。结果如下:1)不同地理种群草地贪夜蛾线粒体标记存在差异,而核基因标记一致基于线粒体细胞色素C氧化酶亚基I（COI）基因,草地贪夜蛾云南、广东和西藏种群属于水稻型,而广西种群属于玉米型;基于Z染色体上的磷酸丙糖异构酶（Tpi）基因,云南、广东、广西和西藏4个种群都属于玉米型。2)不同地理种群草地贪夜蛾对SfMNPV多角体的口服敏感性存在显着差异供试4个地理种群草地贪夜蛾,在幼虫1-4龄期阶段对SfMNPV都存在敏感性差异,且随着龄期增长各种群敏感性水平发生一定的变化,总体而言,广西种群对SfMNPV敏感性最低,西藏种群的敏感性最高,云南和广东种群为一般敏感。3)SfMNPV出芽病毒粒子（budding virus,BV）对不同地理种群草地贪夜蛾的影响幼虫体内直接注射SfMNPV BV,注射后24 h和72 h草地贪夜蛾血淋巴酚氧化酶（phenoloxidase,PO）活性显着提高。注射后24 h广西种群PO活性显着低于西藏种群,但注射后72 h两者差异不显着。但是,对口服病毒多角体敏感性差异最大的广西和西藏种群,因注射病毒粒子造成的死亡率经统计分析无显着性差异。4)肠道微环境对宿主感染SfMNPV具有一定的影响广西和西藏种群肠道pH值存在显着性差异,广西种群pH均值8.999,西藏种群pH均值9.160;荧光增白剂28（Fluorescent Brightener 28,FB28）对草地贪夜蛾感染SfMNPV有一定增效作用,可显着提高低敏感性的广西种群死亡率;链霉素去除肠道菌群的处理对草地贪夜蛾感染SfMNPV的作用不明显;广西种群6龄幼虫肠道菌种类和丰度显着高于西藏种群,广西种群肠道优势菌属为乳杆菌（Lactobacillus）,而西藏种群肠道优势菌属为肠球菌（Enterococcus）。
王承锐[3]（2020）在《春尺蠖新病毒株的鉴定及其生物活性的研究》文中提出为了开发新型的生物杀虫剂,我们从自然死亡的春尺蠖幼虫分离到新病毒株。通过电镜观察,初步确认该新病毒株是一种质型多角体病毒,通过食料给毒法测定其对春尺蠖3龄幼虫和思茅松毛虫3龄幼虫的致死作用,并研究新病毒株与NPV（Nuclear polyhedrosis virus）之间的增效作用。结果如下:（1）新毒株病毒的包涵体为多角体,一个多角体内包埋多个粒病毒粒子。在形态上与其他CPV无明显差别,确定其为质型多角体病毒。命名为春尺蠖质型多角体病毒（Apocheima cinerarius cypovirus,ApciCPV）。（2）ApciCPV对春尺蠖3龄幼虫有很强的毒力,半致死浓度（LC50）为1.42×104 OBs/mL。当ApciNPV+ApciCPV复配剂感染春尺蠖3龄幼虫时,相比ApciNPV单剂,半致死时间（LT50）缩短0.5～10.9 d、最终致死率提高6.7%～43.3%。一定浓度的ApciCPV对ApciNPV有增强作用,并且这种增强作用与复配剂中ApciCPV的浓度成正比。（3）ApciCPV对思茅松毛虫3龄幼虫有很强的毒力,半致死浓度（LC50）为6.62×105 OBs/mL。当DekiNPV+ApciCPV复配剂感染思茅松毛虫3龄幼虫时,相比DekiNPV单剂,半致死时间（LT50）缩短0.5～20 d、最终致死率提高2.8%～66.2%。一定浓度的ApciCPV对DekiNPV有增强作用,并且这种增强作用与复配剂中ApciCPV的浓度成正比。（4）高浓度的ApciCPV与NPV之间存在增效作用,且与复配剂中ApciCPV的浓度成正比,当复配剂中NPV浓度的增加时,增效作用会逐渐减弱最后表现为相加作用;低浓度的ApciCPV与NPV之间则更多表现为相加作用和拮抗作用。
孙雨,陈英健,杨铭鑫,郑桂玲,韩佳辰,李洁,李长友[4]（2020）在《甜菜夜蛾核型多角体病毒青岛分离株Se MNPV-QD的毒力测定》文中指出为评价一株新的甜菜夜蛾核型多角体病毒（青岛分离株SeMNPV-QD）在害虫生物防治中的应用潜力,本文以甜菜夜蛾核型多角体病毒青岛株SeMNPV-QD与美国株SeMNPV-US1为材料,分别测定了病毒对甜菜夜蛾细胞系的感染、对甜菜夜蛾幼虫的室内生物活性以及田间防治效果。研究结果表明,SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对甜菜夜蛾细胞系Se-3的感染率分别为92.34%和93.65%,平均每个细胞的病毒多角体产量分别为23.97和24.10 PIB,差异均不显着;SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对初孵甜菜夜蛾幼虫的LC50分别为4.43×104和4.35×104 PIB/mL,LT50分别为4.12和4.02 d;SeMNPV-QD与SeMNPV-US1对4龄甜菜夜蛾幼虫的LC50分别为9.25×105和4.44×105 PIB/mL,LT50分别为6.20和5.50 d;SeMNPV-QD和SeMNPV-US1对大葱田甜菜夜蛾幼虫具有较好的防治作用,7d的校正防效分别达到74.99%和79.04%。研究结果将为新病毒株的深入研究开发以及甜菜夜蛾的生物防治提供理论依据。
邵天玉,刘兴龙,刘思竹,谢维欣,王克勤[5]（2016）在《我国甜菜夜蛾核型多角体病毒研究新进展》文中进行了进一步梳理核型多角体病毒是昆虫病毒中最大的类群,它能够专一性地侵染并杀死一种或者几种农林害虫,并对害虫天敌、环境和人畜无害,是一种值得推广的绿色生物农药。为有效利用绿色生物农药防治病虫害,对我国近几年关于甜菜夜蛾核多角体病毒的毒力、病毒制剂研究与生产、田间应用及药效试验、增效剂研究、分子生物学等方面进行了阐述,并提出了新的展望和应用需求。
杨苗苗[6]（2012）在《思茅松毛虫核型多角体病毒及全基因组分析》文中指出松毛虫类害虫是我国重大森林害虫之一。思茅松毛虫Dendrolimus kikuchiiMatsumura属鳞翅目Lepidoptera枯叶蛾科Lasiocampidae松毛虫属Dendrolimus。目前防治该害虫以化学农药为主。杆状病毒具有很强的专化性，对环境和非靶标生物安全，是一种理想的病原微生物杀虫剂。世界上已有50多种商品化生产的杆状病毒杀虫剂用于农林害虫的控制。因此，寻找致病力强的杆状病毒来防治该害虫显得非常必要。目前，作者在云南思茅松毛虫重灾区采集到了一株新的思茅松毛虫核型多角体病毒，主要研究结果如下：1.思茅松毛虫核型多角体病毒（DekiNPV）形态学和毒力研究发现了一株新的思茅松毛虫核型多角体病毒，定名为DekiNPV。多角体呈不规则型，直径大小0.792.31μm（n=100），平均直径1.64±0.1μm，其表面凹凸不平，且有大量的长条形、圆形孔洞，长条形居多，大小（173.00254.00）×（55.10116.00） nm；一个多角体中有多个杆状病毒粒子，杆状病毒粒子长约（252.22359.38）×（70.18200.00）nm，两端钝圆或平截，其内含有19个核衣壳，大小（24.0028.60）×（242.00340.00）nm,平均大小25.80±0.86×265.00±12.66nm （n=50），为多粒包埋型。用浓度2.2×1042.2×108PIB/mL5个浓度的DekiNPV接种于3龄思茅松毛虫幼虫发现，DekiNPV对3龄思茅松毛虫幼虫有很强的毒力；LT50随着浓度的降低而增长，分别为6.89、7.18、8.16、10.31和11.13d，LC50为1.72×105PIB/mL；3龄思茅松毛虫幼虫感染DekiNPV后第7d幼虫开始大量死亡，死亡高峰期为感染病毒后的第710d。对在实验室连续传四代后的DekiNPV进行超微结构观察发现，传代后的DekiNPV形态结构与原代一致，具有稳定性。2. DekiNPV基因组全序列分析分析了DekiNPV全基因组序列，DekiNPV基因组大小为141，454bp， C+G含量为48.04%。预测DekiNPV含有146个开放阅读框（ORF），其大小在150个核苷酸以上，并与其它ORF有最小的重叠。其中有133个DekiNPV的ORF与报道已测序的杆状病毒具有同源性，13个ORF为该病毒特有，占全基因组的12.4%。基于DekiNPV的29个杆状病毒核心基因构建了该病毒的进化树，进化分析发现DekiNPV属于鳞翅目杆状病毒Group Ⅰ组，与MaviMNPV、BomaNPV、BmNPV、PlxyMNPV、RoMNPV和AcMNPV亲缘关系近。DekiNPV基因组中含有16个保守的结构基因，DekiNPV基因组缺失P6.9和odv-e56。该基因含有抗凋亡基因iap-1，iap-2和iap-3。DekiNPV基因组含中有12个bro基因。DekiNPV分别与AcMNPV、BmNPV、ChchNPV、LdMNPV、MacoNPV-B、SeMNPV和XecnGV进行了基因对等比较分析，发现该病毒与AcMNPV和BmNPV表现出了最好的线性关系。同源区分析发现，DekiNPV中共有11个hr。3. DekiNPV的PCR检测方法根据DekiNPV特有阅读框ORF146设计两对引物建立PCR检测方法，用DekiNPV基因组DNA为模板扩增出了426bp和655bp片段，PCR产物经测序结果与引物选取片段大小一致。分别以两对引物对DekiNPV的基因组DNA、多角体进行检测，最小量检测均达到了0.8fg/mL DNA和5PIB/mL，在感病虫体内检测到了DekiNPV的存在。该方法具有灵敏度高、特异性强、早期检测等特点，可以用于DekiNPV寄主域、替代寄主和病毒在种群中动态变化等领域的研究。4. DekiNPV寄主域及其替代寄主的研究用11种鳞翅目昆虫（云南松毛虫Dendrolimus houi、马尾松毛Dendrolimus punctatus、文山松毛虫Dendrolimus punctatus wenshanensis、赤松毛虫Dendrolimus spectabilis、美国白蛾Hyphantria cunea、舞毒蛾Lymantria dispar、灰茶尺蠖Ectropis grisescens、棉铃虫Helicoverpa armigera、甜菜夜蛾Spodoptera exigua、小菜蛾Plutella xylostella和斜纹夜蛾Spodoptera litura）和两株昆虫细胞系[sf-9细胞和杨扇舟蛾细胞（CAF-clan II）]研究了DekiNPV的寄主域和替代寄主。研究发现DekiNPV具有很强的专化性，但DekiNPV可以诱发美国白蛾、云南松毛虫、马尾松毛、文山松毛虫和赤松毛虫体内潜伏性感染病毒。
王成燕[7]（2012）在《混合侵染和交替传代对斜纹夜蛾核型多角体病毒宿主域和毒力影响及机制》文中进行了进一步梳理核型多角体病毒（Nucleopolyhedrovirus, NPV）作为一类昆虫病原微生物,资源丰富,对害虫作用独特且对环境安全,是一种理想的害虫生物防治剂。但天然的昆虫病毒因宿主范围窄、作用速度慢和作用活性低,大大限制了其在生产上的应用。如何打破昆虫病毒的专化性以及提高它们的毒力成了拓宽昆虫病毒应用范围的重点和难点。NPV间自然重组现象较为普遍,不同NPV间重组可产生宿主域扩大病毒；另外病毒的毒力与宿主密切相关,在一种新宿主中的连续传代可提升其对传代宿主毒力,不过其对原宿主毒力显着下降。病毒在两种不同宿主中交替传代后,病毒能否对两种宿主同时具有高毒力?尚无实验证明。因此,研究不同病毒混合侵染后的宿主域变化及其在不同宿主中交替传代过程中的毒力演化对于揭示病毒进化规律及发掘宿主域扩大和病毒毒力提升具有着重要意义。本研究以鳞翅目重大害虫斜纹夜蛾Spodoptera litura和甜菜夜蛾S. exigua为靶标对象,首先研究两种病毒混合侵染后的宿主域变化,接着研究宿主域扩大病毒在甜菜夜蛾和斜纹夜蛾中交替传代时的毒力演化,最后研究病毒多角体超微结构变化和遗传变异,主要研究结果如下：1病毒混合侵染后的宿主域扩大和交替传代时的毒力演化本文选用不能经口感染甜菜夜蛾的斜纹夜蛾NPV （SINPV）日本福冈株和不能经口感染斜纹夜蛾的甜菜夜蛾NPV （SeNPV）美国株,将它们共同侵染甜菜夜蛾后,获得了能同时感染甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的宿主域扩大病毒株系,其对斜纹夜蛾的致病力与SINPV相当,致死中浓度（LC50值）无显着差异,同时对甜菜夜蛾也具备了一定的侵染力,但尚显着低于SeNPV对甜菜夜蛾的毒力。进一步将该病毒在甜菜夜蛾和斜纹夜蛾这两种宿主中按4种模式进行交替传代,分别为以甜菜夜蛾和斜纹夜蛾为起始宿主的严格交替传代,以及以甜菜夜蛾和斜纹夜蛾为起始宿主的非严格交替传代,研究病毒毒力的演化规律。发现宿主域扩大病毒在经历斜纹夜蛾和甜菜夜蛾多代交替传递过程中,其对甜菜夜蛾的毒力有显着上升,且对斜纹夜蛾的毒力未有显着下降,但在传递20代过程中,除从斜纹夜蛾开始的严格交替传代模式下,病毒对甜菜夜蛾的毒力一直呈上升趋势,以甜菜夜蛾为起始宿主的严格交替模式以及两种非严格交替传代模式下,病毒对甜菜夜蛾毒力未一直呈上升趋势,在14代以内显着上升,此后则有所下降。研究表明两种宿主中的交替传代可以提高病毒对一种宿主的适应性且同时保持了其对另一种宿主的适应性。2混合侵染和交替传代后多角体超微结构变化通过透射电镜观察研究了病毒混合侵染和交替传代后其多角体超微结构变化。比较了混合侵染前、混合侵染后、交替传代后以及连续传代后病毒的多角体超微结构。观察结果表明,各病毒均属多粒包埋型病毒,混合侵染没有引起病毒多角体大小的改变,多角体直径无显着差异。但经以斜纹夜蛾为起始宿主的交替传代以及在斜纹夜蛾中的连续传代后,病毒多角体的直径显着减小。同时还发现混合侵染和交替传代都没有造成病毒多角体内病毒束数量的改变,多角体内病毒束平均数量在各病毒间无显着差异。但带来病毒束内核衣壳数量的变化,经过混合侵染及在甜菜夜蛾和斜纹夜蛾中的一次交替传代后,病毒束内平均病毒核衣壳数较起始的SINPV福冈株显着下降,在经历20代次交替后,仍显着低于福冈株,而在斜纹夜蛾中连续传代时病毒核衣壳的数量未有显着变化。另外从各病毒束内不同核衣壳的分布来看,SeNPV美国株中病毒束内核衣壳分布均匀,62.5%病毒束中病毒核衣壳数量为3个,而其余病毒则分布较广,在以斜纹夜蛾为起始宿主的交替传代后的病毒中,病毒核衣壳的数量在1-12个间。研究表明,SeNPV和SlNPV昆合侵染以及在两种宿主中交替繁殖后能够改变其多角体的组装,从而带来多角体超微结构的变化。3混合侵染后宿主域扩大病毒polh和iap基因变异通过基因组酶切、基因克隆分析研究了病毒混合侵染后的遗传变异。病毒基因组DNA限制性酶切结果表明,混合侵染后宿主域扩大病毒的基因组DNA酶切图谱较混合侵染前的SINPV福冈株没有产生明显变化,Pst Ⅰ、Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ这4种限制性酶切图谱均与混合侵染前一致。进一步对病毒多角体蛋白基因（polh）分析发现,病毒混合侵染后其polh基因序列较混合侵染前SlNPV在第281个碱基上发生突变,氨基酸序列也发生相应的变化。另还对宿主域扩大病毒细胞凋亡抑制基因（iap）进行了克隆,发现其与已报道的SpliNPV iap基因同源性达95%,与SlNPV中国株G2iap基因同源性和SlNPV日本株iap同源性均只有80%。4混合侵染和交替传代后病毒全基因组序列变化分析对混合侵染和交替传代前后三个病毒株系的全基因组序列进行了分析,研究发现,SlNPV和SeNPV经过混合侵染后产生的宿主域扩大病毒,在基因组大小上较SlNPV福冈株变小,基因数量也有变化,少了1个基因,基因总长度也有增加；再经过交替传代,基因总长度进一步变长。再从各病毒基因总长度占基因组的百分比来看,混合侵染后产生的宿主域扩大病毒较混合侵染前SlNPV基因总长度占基因组百分增加,再经交替传递20代后,百分比进一步增加。各病毒株系GC含量变化不大。病毒基因组全序列具体分析则发现混合侵染后病毒lef-8（晚期表达因子）基因产生了一个碱基的变化,另外病毒基因组内有一个255bp片段的插入,且在进一步交替传递20代后,此变化仍存在。
徐树兰[8]（2011）在《10亿PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治甘蓝甜菜夜蛾的效果及对天敌昆虫的影响》文中研究表明10亿PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治甘蓝甜菜夜蛾的田间药效试验结果表明,该药剂对甘蓝甜菜夜蛾具有良好的防治效果。田间每667 m2用量75～100 g时,药后5 d对甜菜夜蛾幼虫的防效可达80%以上,药后10 d防效仍高达70%以上,具有极好的持效性。而该药剂对菜田蜘蛛等天敌影响的统计表明,其对蜘蛛种群影响较小,当试验药剂和对照药剂用量为75 g时,药后5 d和10 d,百株甘蓝上蜘蛛的减退率分别为1.2%和0.5%,显着低于对照药剂3%高效氯氰菊酯.107PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂处理区的减退率。说明该药剂具有良好的应用前景。
汤欣欣[9]（2011）在《高效重组SpltMNPV的构建和筛选》文中研究说明斜纹夜蛾（Spedoptera litura）是一种杂食性农业和林业害虫,国外主要分布于朝鲜、日本、印度、澳大利亚等国,在我国各省、市、自治区均有发生,其寄主范围极广,能够危害109科389种寄主植物,是各种农作物和绿化植物的重要害虫。尽管斜纹夜蛾核型多角体病（ Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedroviruse,SpltMNPV ）已在中国商品化并大规模用来控制棉花叶虫,但它缓慢的杀虫速度、较窄的宿主范围、对紫外线敏感等特点限制了其在全国范围的推广。因此,开发高效重组SpltMNPV杀虫剂显得日益迫切。SpltMNPV日本株（C3）（又命名为SpltMNPV II）是Kamiya等从日本全国各地野外感病幼虫收集、分离到189个SpltMNPV克隆中繁殖率和毒力极强的一种新型病毒株。本研究在SpltMNPV II的基础上成功构建并筛选了egt缺失的,表达BmKITa1成熟肽的重组SpltMNPV,并测定其生物学活性。主要研究成果:1.运用分子克隆方法构建了重组转移载体Psk-Δegt-Pph-egfp-Pph- BmK ITa1,载体质粒和SpltMNPV II基因组DNA共转染SpLi细胞,经多轮荧光斑法和有限稀释法相结合成功筛选出重组病毒SpltMNPV-Δegt-Pph-egfp-Pph- BmK ITa1,并测定其生物学活性。和野生型病毒相比,在病毒浓度为107 polyhedra/larva时,重组SpltMNPV-Δegt-Pph-egfp-Pph- BmK ITa1的杀虫速度提高了50%。2.运用分子克隆方法构建了重组转移载Psk-Δegt-Pph-egfp-ie-1-BmK ITa1,载体质粒和SpltMNPV II基因组DNA共转染SpLi细胞,经多轮荧光斑法和有限稀释法相结合成功筛选出重组病毒SpltMNPV-Δegt-Pph-egfp–ie-1-BmK ITa1,并测定其生物学活性。和野生型病毒相比,在病毒浓度为107 polyhedra/larva时,重组SpltMNPV-Δegt-Pph-egfp-ie-1- BmK ITa1杀虫速度提高了23%。3.运用分子克隆方法成功构建了BmKITa1和egfp融合表达的重组转移载体Psk-Δegt-Pph-BmKITa1-egfp。载体质粒和SpltMNPV II基因组DNA共转染SpLi细胞后发现荧光细胞,但经一轮筛选后荧光消失。成果在进一步研制高效斜纹夜蛾重组生物杀虫剂中具有重大意义。
徐彩霞,韩日畴[10]（2010）在《不同温度和浓度下核型多角体病毒对甜菜夜蛾的致病力》文中进行了进一步梳理于室内测定了不同温度下核型多角体病毒对甜菜夜蛾的致病力和不同浓度核型多角体病毒对甜菜夜蛾致病力的影响。结果表明,在（25±1）℃条件下,病毒浓度为1×107PIBs/mL、1×106PIBs/mL、1×105PIBs/mL、1×104PIBs/mL、1×103PIBs/mL时,甜菜夜蛾3龄幼虫感染10d后的累计死亡率分别为83.3%,83.3%,86.7%,90.3%,96.7%,但处理间差异不显着。温度显着影响甜菜夜蛾病毒的致病力。病毒浓度为1×106PIBs/mL时,在30℃和35℃下,甜菜夜蛾3龄幼虫感染10d后的累计死亡率均为96.7%,在15℃下仅为53.3%。在35℃,30℃,25℃,20℃,15℃下,LT50分别为5.0d,4.8d,5.4d,8.8d,13.7d。
二、两株甜菜夜蛾核型多角体病毒的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、两株甜菜夜蛾核型多角体病毒的研究（论文提纲范文）
（2）我国不同地理种群草地贪夜蛾对其核型多角体病毒（SfMNPV）敏感性及影响因子研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 文献综述 |
| 1.1.1 草地贪夜蛾概述及入侵现状 |
| 1.1.1.1 草地贪夜蛾的生物学特征和危害 |
| 1.1.1.2 草地贪夜蛾种群的生物型 |
| 1.1.1.3 草地贪夜蛾的入侵现状及迁飞路径 |
| 1.1.2 核多角体病毒与昆虫宿主 |
| 1.1.2.1 核多角体病毒感染宿主过程 |
| 1.1.2.2 昆虫对病毒的防御与免疫应答 |
| 1.1.2.3 核多角体病毒对宿主的适应性 |
| 1.1.2.4 SfMNPV研究进展 |
| 1.1.2.5 宿主种内差异对病毒敏感性影响 |
| 1.2 研究目的与意义 |
| 1.3 研究内容与技术路线 |
| 第二章 不同地理种群草地贪夜蛾基因型鉴定及对SfMNPV的敏感性评价 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 仪器设备 |
| 2.1.3 实验试剂 |
| 2.1.4 实验方法 |
| 2.1.4.1 SfMNPV病毒多角体制备 |
| 2.1.4.2 草地贪夜蛾种群基因型鉴定 |
| 2.1.4.3 室内生物测定对SfMNPV的敏感性 |
| 2.1.5 数据处理 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不同地理种群草地贪夜蛾基因型分析 |
| 2.2.2 不同地理种群草地贪夜蛾对口服感染SfMNPV的敏感性差异 |
| 2.2.2.1 不同地理种群草地贪夜蛾1龄末期幼虫对SfMNPV的敏感性 |
| 2.2.2.2 不同地理种群草地贪夜蛾2龄末期幼虫对SfMNPV的敏感性 |
| 2.2.2.3 不同地理种群草地贪夜蛾3龄末期幼虫对SfMNPV的敏感性 |
| 2.2.2.4 不同地理种群草地贪夜蛾4龄初期幼虫对SfMNPV的敏感性 |
| 2.2.2.5 不同地理种群草地贪夜蛾4龄中期幼虫对SfMNPV的敏感性 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 不同地理种群草地贪夜蛾对Sf MNPV BV系统感染敏感性 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 仪器设备 |
| 3.1.3 实验试剂 |
| 3.1.4 实验方法 |
| 3.1.4.1 SfMNPV BV的制备 |
| 3.1.4.2 SfMNPV BV的定量 |
| 3.1.4.3 SfMNPV BV的注射 |
| 3.1.4.4 PO活性测定 |
| 3.1.5 数据处理 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 不同地理种群草地贪夜蛾对SfMNPV BV系统感染效率差异 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 草地贪夜蛾肠道微环境对宿主感染SfMNPV的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 仪器设备 |
| 4.1.3 实验试剂 |
| 4.1.4 实验方法 |
| 4.1.4.1 中肠pH测定 |
| 4.1.4.2 添加荧光增白剂FB28或链霉素进行生物测定 |
| 4.1.4.3 草地贪夜蛾肠道菌群16S rDNA测序 |
| 4.1.5 数据处理 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 不同地理种群草地贪夜蛾肠液pH |
| 4.2.2 添加荧光增白剂FB28对草地贪夜蛾口服感染SfMNPV的影响 |
| 4.2.3 不同地理种群草地贪夜蛾肠道菌群分析 |
| 4.2.4 添加链霉素对草地贪夜蛾口服感染SfMNPV的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）春尺蠖新病毒株的鉴定及其生物活性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 质型多角体病毒 |
| 1.1.1 质型多角体病毒的分类 |
| 1.1.2 质型多角体病毒的结构及生化特性 |
| 1.1.3 质型多角体的寄主域/交叉感染 |
| 1.1.4 质型多角体的侵染与发生 |
| 1.1.5 质型多角体病毒对昆虫的影响 |
| 1.1.6 质型多角体病毒与病原体的相互作用 |
| 1.1.7 质型多角体病毒的应用 |
| 1.2 春尺蠖及春尺蠖核型多角体病毒 |
| 1.3 思茅松毛虫及思茅松毛虫核型多角体病毒 |
| 1.4 研究目的与意义 |
| 1.5 研究内容 |
| 1.6 技术路线 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 供试昆虫 |
| 2.1.2 供试病毒 |
| 2.1.3 仪器与设备 |
| 2.1.4 试剂及溶液配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 春尺蠖质型多角体病毒(ApciCPV)新病毒株鉴定 |
| 2.2.2 ApciCPV对春尺蠖的毒力测定 |
| 2.2.3 复配剂(ApciNPV+ApciCPV)的毒力测定 |
| 2.2.4 ApciCPV对思茅松毛虫的毒力测定 |
| 2.2.5 复配剂(DekiNPV+ApciCPV)的毒力测定 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 春尺蠖新病毒株的鉴定 |
| 3.1.1 春尺蠖新病毒株的光学显微镜观察 |
| 3.1.2 春尺蠖新病毒株的鉴定 |
| 3.2 ApciCPV对春尺蠖的生物活性 |
| 3.2.1 ApciCPV对春尺蠖3龄幼虫的致死作用 |
| 3.2.2 ApciCPV感染春尺蠖3龄幼虫的死亡率与时间的关系 |
| 3.3 ApciCPV与ApciNPV的复配后的增效作用 |
| 3.3.1 复配剂(ApciNPV+ApciCPV)对春尺蠖3龄幼虫的毒力 |
| 3.3.2 复配剂(ApciNPV+ApciCPV)感染春尺蠖3龄幼虫的死亡率与时间的关系 |
| 3.3.3 复配剂(ApciNPV+ApciCPV)对春尺蠖3龄幼虫的致死中时间 |
| 3.3.4 ApciCPV与ApciNPV对春尺蠖3龄幼虫的互作分析 |
| 3.4 ApciCPV对思茅松毛虫的生物活性 |
| 3.4.1 ApciCPV对思茅松毛虫3龄幼虫的致死作用 |
| 3.4.2 ApciCPV感染思茅松毛虫3龄幼虫的死亡率与时间的关系 |
| 3.5 ApciCPV与DekiNPV的复配后的增效作用 |
| 3.5.1 复配剂(DekiNPV+ApciCPV)对思茅松毛虫3龄幼虫的毒力 |
| 3.5.2 复配剂(DekiNPV+ApciCPV)感染思茅松毛虫3龄幼虫的死亡率与时间的关系 |
| 3.5.3 复配剂(DekiNPV+ApciCPV)对春尺蠖3龄幼虫的致死中时间 |
| 3.5.4 ApciCPV与DekiNPV对思茅松毛虫3龄幼虫的互作分析 |
| 4 结论与讨论 |
| 4.1 结论 |
| 4.2 讨论 |
| 4.2.1 ApciCPV的寄主域 |
| 4.2.2 ApciCPV对核型多角体病毒的增效作用 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（4）甜菜夜蛾核型多角体病毒青岛分离株Se MNPV-QD的毒力测定（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试昆虫 |
| 1.2 供试病毒和制剂 |
| 1.3 病毒的增殖和纯化 |
| 1.4 细胞感染率和病毒多角体产量的测定 |
| 1.5 病毒的室内毒力测定 |
| 1.6 病毒的田间防治试验 |
| 1.7 数据统计与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 病毒对甜菜夜蛾细胞的感染率和病毒产量 |
| 2.2 病毒对甜菜夜蛾初孵幼虫的毒力 |
| 2.3 病毒对甜菜夜蛾4龄幼虫的毒力 |
| 2.4 病毒对甜菜夜蛾幼虫的田间防治效果 |
| 3 讨论 |
（5）我国甜菜夜蛾核型多角体病毒研究新进展（论文提纲范文）
| 1 病毒毒力 |
| 2 病毒制剂研究与生产 |
| 3 田间应用及药效试验 |
| 4 增效剂研究 |
| 5 分子生物学研究 |
| 5.1 SeNPV基因组结构分析 |
| 5.2 SeNPV部分基因的克隆及功能分析 |
| 6 讨论 |
（6）思茅松毛虫核型多角体病毒及全基因组分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 松毛虫病毒研究进展 |
| 1.1.1 松毛虫病毒种类 |
| 1.1.2 国内外松毛虫病毒的应用 |
| 1.1.3 松毛虫病毒的交叉感染研究 |
| 1.1.4 松毛虫病毒基因组序列结构与功能的研究 |
| 1.1.5 问题及展望 |
| 1.2 杆状病毒的分类学和生物学 |
| 1.2.1 分类 |
| 1.2.2 杆状病毒的感染周期 |
| 1.2.3 杆状病毒基因组结构 |
| 1.2.4 杆状病毒的重复基因 |
| 1.2.5 涉及杆状病毒宿主域的病毒基因 |
| 1.2.6 杆状病毒基因组的进化 |
| 1.3 杆状病毒杀虫剂 |
| 1.3.1 体内生产 |
| 1.3.2 体外生产 |
| 1.3.3 病毒的利用 |
| 1.3.4 杆状病毒在害虫防治中的限制因素 |
| 1.3.5 杆状病毒杀虫剂的利用前景和展望 |
| 1.4 本研究的目的及意义 |
| 1.5 主要研究内容 |
| 第二章 思茅松毛虫核型多角体病毒的形态及毒力研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 材料 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.2.3 主要仪器及产地 |
| 2.3 方法 |
| 2.3.1 病毒的初步鉴定 |
| 2.3.2 病毒的分离纯化 |
| 2.3.3 病毒的染色鉴定 |
| 2.3.4 病毒超微结构观察 |
| 2.3.5 毒力测定 |
| 2.3.6 传代病毒超微结构的观察 |
| 2.3.7 数据分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 思茅松毛虫室内饲养 |
| 2.4.2 病毒鉴定 |
| 2.4.3 思茅松毛虫核型多角体病毒的形态特征 |
| 2.4.4 不同感染浓度与死亡率的关系 |
| 2.5 结论与讨论 |
| 第三章 思茅松毛虫核型多角体病毒全基因组分析 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 DekiNPV 来源 |
| 3.2.2 主要实验试剂 |
| 3.2.3 主要仪器及产地 |
| 3.2.4 主要试剂及缓冲液的配制 |
| 3.2.5 DekiNPV 基因组 DNA 的提取 |
| 3.2.6 DNA 测序 |
| 3.2.7 DNA 序列分析 |
| 3.2.8 系统分析（Phylogenetic analysis） |
| 3.2.9 核酸序列号 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 DekiNPV 基因组序列分析 |
| 3.3.2 DekiNPV 基因组结构 |
| 3.3.3 DekiNPV 与其它杆状病毒的 ORF 的比较 |
| 3.3.4 结构基因 |
| 3.3.5 DNA 复制和晚期基因的表达 |
| 3.3.6 抗凋亡基因 |
| 3.3.7 辅助功能基因 |
| 3.3.8 重复基因（bro genes） |
| 3.3.9 DekiNPV 特有 ORF |
| 3.3.10 基因对等图分析 |
| 3.3.11 同源区（homologous regions/hr） |
| 3.3.12 进化分析 |
| 3.4 结论与讨论 |
| 第四章 思茅松毛虫核型多角体病毒的 PCR 检测方法 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 病毒株和多角体纯化 |
| 4.2.2 主要试剂及溶液配制 |
| 4.2.3 主要仪器 |
| 4.2.4 病毒 DNA 的提取 |
| 4.2.5 病虫总 DNA 的提取 |
| 4.2.6 健康虫总 DNA 的提取 |
| 4.2.7 DekiNPV 的 PCR 检测 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 DekiNPV 基因组 DNA 的 PCR 扩增与特异性检测结果 |
| 4.3.2 DekiNPV 基因组 DNA 的 6 个浓度的 PCR 检测结果 |
| 4.3.3 不同底物目标片段的检测结果 |
| 4.3.4 DekiNPV 寄主域的 PCR 检测 |
| 4.4 结论与讨论 |
| 第五章 思茅松毛虫核型多角体病毒寄主域和替代寄主的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 试虫来源 |
| 5.2.2 细胞来源 |
| 5.2.3 主要试剂 |
| 5.2.4 主要仪器 |
| 5.2.5 病毒纯化 |
| 5.2.6 接种物 DekiNPV 纯度的检查 |
| 5.2.7 病毒粒子的制备 |
| 5.2.8 基于 11 种鳞翅目昆虫对 DekiNPV 寄主域及其替代寄主的研究 |
| 5.2.9 两种处理后死亡幼虫体内是否存在 NPV 和 CPV 混合感染的染色鉴定 |
| 5.2.10 两株昆虫细胞系在 DekiNPV 寄主域上的研究 |
| 5.2.11 两种处理后死亡的四种松毛虫和美国白蛾体内多角体的分离和鉴定 |
| 5.2.12 病毒 DNA 的提取 |
| 5.2.13 酶切分析 |
| 5.2.14 幼虫总 DNA 的提取 |
| 5.2.15 美国白蛾幼虫潜伏性病毒的检测 |
| 5.2.16 四种松毛虫幼虫潜伏性病毒的检测 |
| 5.2.17 两种处理后 4 种松毛虫和美国白蛾体内分离到的多角体是否含有DekiNPV 的 PCR 检测 |
| 5.2.18 数据分析 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 接种物的纯度检测 |
| 5.3.2 DekiNPV 对 11 种鳞翅目昆虫的致死率 |
| 5.3.3 两种处理后 5 种死亡幼虫体内是否存在 NPV 和 CPV 混合感染的染色鉴定结果 |
| 5.3.4 DekiNPV 对 2 株昆虫细胞系的感染研究 |
| 5.3.5 两种处理后死亡虫体内病毒的超微结构观察 |
| 5.3.6 两种处理后美国白蛾幼虫中分离到的病毒身份的鉴定 |
| 5.3.7 四种松毛虫和美国白蛾的潜伏性病毒的确认 |
| 5.3.8 DekiNPV 诱发潜伏感染的能力 |
| 5.4 结论与讨论 |
| 第六章 全文总结 |
| 6.1 主要结论 |
| 6.2 本研究的创新点 |
| 6.3 有待进一步的研究工作 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）混合侵染和交替传代对斜纹夜蛾核型多角体病毒宿主域和毒力影响及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 综述 |
| 1 昆虫病毒的种类及应用现状 |
| 1.1 核型核多角体病毒 |
| 1.2 颗粒体病毒 |
| 1.3 质型多角体病毒 |
| 1.4 昆虫痘病毒 |
| 2 病毒重组拓宽病毒杀虫谱研究进展 |
| 2.1 昆虫病毒自然重组拓宽杀虫谱 |
| 2.2 运用基因工程技术扩大宿主域 |
| 3 宿主中连续传代提升病毒毒力研究进展 |
| 4 病毒宿主域和毒力及杀虫速度相关基因研究进展 |
| 4.1 与宿主域相关的基因 |
| 4.2 与毒力速度相关的基因 |
| 5 论文研究内容及目的意义 |
| 5.1 研究内容 |
| 5.2 研究目的与意义 |
| 5.3 技术路线 |
| 第二章 混合侵染和交替传代时斜纹夜蛾核型多角体病毒宿主域扩大和毒力演化 |
| 摘要 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 两种核型多角体病毒混合侵染后的宿主域扩大 |
| 2.2 宿主域扩大病毒交替传代时对斜纹夜蛾毒力的演化 |
| 2.3 宿主域扩大病毒对甜菜夜蛾毒力的演化 |
| 3 讨论 |
| 第三章 混合侵染和交替传代后病毒多角体超微结构变化 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 病毒 |
| 1.2 病毒的蔗糖密度梯度离心 |
| 1.3 超薄切片样品制备 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 透射电镜观察结果 |
| 3 讨论 |
| 第四章 混合侵染后宿主域扩大病毒polh和iap基因研究 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 病毒混合侵染前后基因组DNA限制性酶切图谱比较 |
| 2.2 宿主域扩大病毒polh基因变异 |
| 2.3 宿主域扩大病毒Iap基因的克隆 |
| 3 讨论 |
| 第五章 病毒宿主域扩大和毒力提升后其全基因组变异分析 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 病毒 |
| 1.2 病毒DNA的提取 |
| 1.3 DNA浓度测定 |
| 1.4 基因组全序列测定分析 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 全基因组序列分析和基因预测 |
| 2.2 混合侵染和交替传代后病毒基因组变异分析 |
| 3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（8）10亿PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治甘蓝甜菜夜蛾的效果及对天敌昆虫的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 调查方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 制剂对甘蓝上甜菜夜蛾的防治效果 |
| 2.2 制剂对菜田天敌数量的影响 |
| 3 结语 |
（9）高效重组SpltMNPV的构建和筛选（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 昆虫杆状病毒杀虫剂研究进展 |
| 1. 昆虫杆状病毒简介 |
| 2. 昆虫病毒杀虫剂 |
| 3. 防紫外研究 |
| 4. 扩大宿主研究 |
| 5. 生物安全性 |
| 6. 结语与展望 |
| 参考文献 |
| 第二章 立题依据和研究内容 |
| 1 研究背景及目的、意义 |
| 2 研究内容 |
| 参考文献 |
| 第三章 主要试剂与常用试验方法 |
| 第一节 常用实验材料 |
| 第二节 常用实验方法 |
| 第四章 重组SpltMNPV的构建和筛选 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 重组病毒的生物学活性测定 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第六章 研究总结 |
| 1 工作总结 |
| 2 存在问题与研究展望 |
| 3 创新点 |
| 附录一： 常用缩略语 |
| 在校期间发表的论文及科研成果 |
| 致谢 |
（10）不同温度和浓度下核型多角体病毒对甜菜夜蛾的致病力（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试病毒 |
| 1.2 供试昆虫 |
| 1.3 试验方法 |
| (1) 不同浓度SeNPV对甜菜夜蛾致病力的影响 |
| (2) 不同温度下SeNPV对甜菜夜蛾的致病力 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同浓度下核型多角体病毒对甜菜夜蛾致病力的影响 |
| 2.2 不同温度下核型多角体病毒对甜菜夜蛾的致病力的影响 |
| 3 结论与讨论 |
四、两株甜菜夜蛾核型多角体病毒的研究（论文参考文献）
- [1]甜菜夜蛾miR-2763对Se301细胞和甜菜夜蛾核型多角体病毒（SeMNPV）感染的影响[D]. 刘志成. 贵州师范大学, 2021
- [2]我国不同地理种群草地贪夜蛾对其核型多角体病毒（SfMNPV）敏感性及影响因子研究[D]. 程露强. 扬州大学, 2021(09)
- [3]春尺蠖新病毒株的鉴定及其生物活性的研究[D]. 王承锐. 内蒙古农业大学, 2020(02)
- [4]甜菜夜蛾核型多角体病毒青岛分离株Se MNPV-QD的毒力测定[J]. 孙雨,陈英健,杨铭鑫,郑桂玲,韩佳辰,李洁,李长友. 中国生物防治学报, 2020(05)
- [5]我国甜菜夜蛾核型多角体病毒研究新进展[J]. 邵天玉,刘兴龙,刘思竹,谢维欣,王克勤. 黑龙江农业科学, 2016(01)
- [6]思茅松毛虫核型多角体病毒及全基因组分析[D]. 杨苗苗. 西北农林科技大学, 2012(06)
- [7]混合侵染和交替传代对斜纹夜蛾核型多角体病毒宿主域和毒力影响及机制[D]. 王成燕. 南京农业大学, 2012(04)
- [8]10亿PIB/mL甜菜夜蛾核型多角体病毒悬浮剂防治甘蓝甜菜夜蛾的效果及对天敌昆虫的影响[J]. 徐树兰. 广东农业科学, 2011(12)
- [9]高效重组SpltMNPV的构建和筛选[D]. 汤欣欣. 苏州大学, 2011(06)
- [10]不同温度和浓度下核型多角体病毒对甜菜夜蛾的致病力[J]. 徐彩霞,韩日畴. 长江蔬菜, 2010(18)