一、保肝宁抗大鼠肝纤维化的作用（论文文献综述）
张强[1]（2021）在《基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制》文中研究表明肝纤维化（Hverfibrosis,LF）是肝胆系统疾病中的常见病,并且是大多数慢性肝病发展的必然阶段。目前医学界普遍认为早期肝纤维化能够逆转,但如何进行逆转,目前尚未形成普遍的共识。肝纤维化早期产生的诸多病理变化中,人们对肝窦内皮细胞（sinusoidal endothelial cells,SECs）的病理变化给予的关注逐渐增多,其特征性的细胞学行为改变包括“窗口”尺寸与数量的变化以及连续性基底膜的形成,一旦SECs发生去窗口化后,则肝纤维化的进程难以逆转,目前这已是不争的事实。目前针对肝纤维化的治疗,现代医学尚且只能给予病因治疗,针对肝纤维化本身而言,目前还没有疗效肯定的药物或治疗手段问世。中医药学在治疗肝纤维化方面的经验历史较长,并对其发病机制形成了完整的认识,尤其是在治未病思想指导下,针对慢性肝病给予早期干预,这在一定程度上能够降低患者未来发生肝纤维化、肝硬化的风险。芪术颗粒是姚乃礼教授经过多年的临床经验总结,结合目前中医药学界对肝纤维化的普遍认识基础上创制的治疗肝纤维化常用方,本课题在国家自然基金“基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制”（NO:81774282）的资助下,结合课题组前期的研究成果探讨益气活血方芪术颗粒治疗肝纤维化的机制。1.基于益气活血法治疗肝纤维化临床疗效的Meta分析目的:以Meta分析的方法评价益气活血法治疗肝纤维化的临床疗效。方法:1.以PubMed、中国知识基础设施工程数据库、万方数据知识服务平台为检索资料库,检索时间跨度为自建库到2020年12月31日;以检索词“liver fibrosis”、“hepatic fibrosis”为检索词,然后以“effect”或者“efficacy”作为关键词逐篇进行排除;以“肝纤维化”作为检索词进行检索,然后以“临床观察”、“疗效分析”作为关键词逐篇进行排除。以上数据库没有语言限制。2.纳入随机对照临床研究类文献,以肝纤维化四项、肝脏瞬时弹性成像、肝脾脏的形态、门脾静脉的宽度、不良反应、安全性等结局指标作为考核指标。结果:本次研究共纳入合格文献共93篇,其中有86篇文献以肝纤维化四项作为临床评价指标,两组对比显示中药组的临床疗效比对照组更好,结果对比具有统计学差异[MD=51.15,95%CI（56.95,45.35）,P<0.00001]。15篇文献以肝硬度值作为临床考核指标,两组对比显示中药组在改善肝硬度值方面具有更好的疗效,比较结果具有统计学差异[MD=3.52,95%CI（4.78,2.26）,P<0.00001]。33 篇文献研究以门静脉直径作为临床考核指标,两组对比显示中药组在改善门静脉直径方面具有更好的疗效,比较结果具有统计学差异[MD=1.20,95%CI（2.14,0.26）,P=0.01]。31篇文献研究以脾脏厚度作为临床考核指标,两组对比显示中药组在改善脾脏厚度方面具有更好的疗效,比较结果具有统计学差异[MD=6.83,95%CI（9.54,4.12）,P<0.00001]。13篇文献研究以脾静脉直径作为临床考核指标,两组对比显示中药组在改善脾静脉直径方面具有更好的疗效,比较结果具有统计学差异[MD=1.77,95%CI（3.04,0.49）,P=0.007]。结论:以益气活血为主要功效的中药组方在治疗肝纤维化方面相较于西药而言具有更好的临床疗效。2.基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制目的:（1）研究芪术颗粒对肝纤维化大鼠肝脏炎症因子、肝纤维化指标以及病理组织学的调控作用。（2）通过qRT-PCR、Western blot、免疫荧光法明确芪术颗粒对肝窦内皮细胞eNOSmRNA、eNOS、NO表达的影响。（3）基于多相多级次多孔介质理论,明确芪术颗粒干预下肝窦内皮细胞的力学特征。方法:（1）以四氯化碳作为肝纤维化的诱导剂,构建肝纤维化大鼠模型,造模同时给予芪术颗粒进行干预,通过Elisa法、HE以及Masson染色研究芪术颗粒对肝纤维化大鼠的生化、病理组织学的影响。（2）原位胶原酶灌注+离体消化+梯度密度分离法分离提取肝窦内皮细胞。（3）以10%肝纤维化大鼠血清+5%的胎牛血清作为外在损伤因素作用于体外培养状态的肝窦内皮细胞,模拟体内生化环境,构建肝窦内皮细胞损伤模型。将细胞按照正常对照组、损伤组、正常大鼠血清损伤组、芪术颗粒含药血清低、中、高浓度进行分组。（4）采用 qRT-PCR、Western blot、免疫荧光法检测胞内eNOSmRNA、eNOS、NO的表达情况。（5）基于多相多级次多孔介质理论,采用原子力显微镜表征芪术颗粒干预下肝窦内皮细胞的力学属性。结果:（1）芪术颗粒能够改善肝纤维化大鼠生化指标,改善肝脏病理组织形态。（2）经过细胞形态以及免疫荧光鉴定可知,我们所提取的细胞为大鼠肝窦内皮细胞,且纯度较高。（3）经 qRT-PCR、Western blot、免疫荧光法检测胞内 eNOSmRNA、eNOS、NO显示芪术颗粒含药血清能够上调eNOSmRNA、eNOS、NO的表达。（4）经过芪术颗粒含药血清干预后,肝窦内皮细胞的骨架模量、粘度均有所提高,使肝窦内皮细胞向正常力学状态转变,而其扩散系数无明显变化。结论:（1）芪术颗粒能够抑制肝脏炎症状态,恢复肝脏正常组织形态。（2）芪术颗粒能够上调eNOSmRNA、eNOS、NO的表达,从而改善肝窦内皮细胞的病理状态,这可能是其抗肝纤维化的重要机制之一。（3）芪术颗粒能够改善肝窦内皮细胞的力学状态,促进肝窦内皮细胞向正常力学状态恢复,这可能是其发挥抗肝纤维化的另一重要机制。
田园硕[2]（2021）在《活血软坚扶正方干预乙肝后肝纤维化的临床疗效研究及机制探索》文中认为研究目的:本研究通过网络药理学方法筛选活血软坚扶正方治疗乙肝后肝纤维化的作用靶点、信号通路;通过临床研究观察活血软坚扶正方对气虚血瘀型乙肝后肝纤维化患者的有效性和安全性,并通过对人转化生长因子β 1、金属蛋白酶抑制因子1浓度的测定,探讨活血软坚扶正方干预本病的可能疗效机制,为临床应用提供科学依据。研究方法:1.网络药理学研究:采用 TCMSP、TCMID、SwissTargetPrediction、PubChem、DisGeNET、OMIM、GeneCards等数据库筛选活血软坚扶正方活性成分及与乙肝后肝纤维化相关靶基因,采用Cytoscape软件构建“方药-成分-靶点-疾病”网络图,采用String数据库构建蛋白质相互作用网络,采用Metascape对活血软坚扶正方治疗乙肝后肝纤维化关键作用靶点进行GO富集分析和KEGG富集分析,获取活血软坚扶正方治疗乙肝后肝纤维化的主要生物过程和信号通路。2.临床试验研究:采用随机数分组方法,将符合纳入标准、不符合排除标准的63例气虚血瘀型乙肝后肝纤维化患者随机分为中药组和对照组,中药组33例（后脱落3例）,对照组30例。在抗病毒治疗的基础上,中药组予活血软坚扶正方,对照组予复方鳖甲软肝片,连续干预6个月。两组均于治疗前后记录中医证候评分、检测肝弹性值,检查肝功能、血清蛋白、凝血功能、肝纤四项、人转化生长因子β1、血清金属蛋白酶抑制因子1,计算无创肝纤维化指标（APRI、FIB-4）,并在治疗前、治疗3个月、治疗6个月时检测血、尿、便常规等安全性指标。观察比较两组患者治疗前后的肝弹性值、肝纤四项、APRI、FIB-4、肝功能、血清蛋白、凝血功能、人转化生长因子β1、血清金属蛋白酶抑制因子1、中医证候评分以及相关安全性指标的变化,并统计分析。研究结果:1.网络药理学研究结果研究最终共筛选获取33个活性成分,129个作用靶点与活血软坚扶正方治疗乙肝后肝纤维化密切相关。活血软坚扶正治疗乙肝后肝纤维化主要涉及生物过程、细胞组成、分子功能等多层次功能,通过调节PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路、phospholipase D信号通路、HIF-1α信号通路、FoxO信号通路、JAK-STAT信号通路、IL-17信号通路、MAPK信号通路、AMPK信号通路、TNF信号通路、PPARγ信号通路等多个通路等来发挥治疗作用。2.临床试验研究结果（1）影像学肝纤维化指标:中药组和对照组组内对比均能够显着降低患者的肝弹性值（P<0.01）,且中药组疗效优于对照组（P<0.05）。（2）血清学肝纤维化指标:中药组能显着降低血清中CIV的水平（P<0.01）,对照组治疗前后CIV无明显差异（3）无创肝纤维化指标:中药组和对照组组内对比均能降低FIB-4的水平（P<0.05）,且中药组疗效优于对照组（P<0.05）;中药组可显着降低APRI的水平（P<0.01）,对照组治疗前后APRI无显着差异。（4）肝功能相关指标:中药组和对照组组内对比均能显着降低血清中TBIL的水平（P<0.05）,且两组组间无明显差异;中药组可显着降低AST的水平（P<0.01）,对照组治疗前后AST无显着差异。（5）血清蛋白相关指标:两组治疗前后组内对比ALB和GLO水平无显着差异。（6）凝血功能相关指标:中药组可显着升高的PTA和PLT的水平（P<0.01）,对照组无明显PTA和PLT升高。（7）TIMP-1和TGF-β1:中药组可降低血清中TIMP-1的浓度（P>0.05）,对照组能够降低血清中TGF-β1的浓度（P>0.05）,但TIMP-1和TGF-β1组内、组间差异均无统计学意义。（8）中医证候指标:中药组和对照组均能明显降低患者的中医证候评分（P<0.01）,且中药组疗效优于对照组（P<0.01）。结论:1.网络药理学研究提示:活血软坚扶正方改善乙肝后肝纤维化具有多层次、多系统和整体干预的特点。2.通过影像学、血清学、无创肝纤维化指标三种方式的比较,发现:活血软坚扶正方可有效抑制乙肝后肝纤维化的形成。3.活血软坚扶正方能够显着改善气虚血瘀型乙肝后肝纤维化患者的症状、减轻肝脏炎症,调节凝血功能。4.活血软坚扶正方干预血清中金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）和人转化生长因子β1（TGF-β1）的作用不显着,药物对其可能存在一定抑制作用,但是否是主要干预因子尚存疑,需进一步的研究进行验证。
莫婵[3]（2021）在《保肝宁和人参皂苷Rg1对肝纤维化小鼠IDO1及树突状细胞的作用机制研究》文中提出背景与目的:肝纤维化是目前难治性疾病之一,加快对其病理机制和创新药物的研发刻不容缓。前期研究表明肝纤维化的发生与肝脏免疫微环境的改变密切相关。保肝宁从清热祛湿解毒、活血化瘀软坚、益气疏肝健脾治疗临床上肝纤维化患者取得良好疗效。本研究旨在阐明保肝宁和人参皂苷Rg1是否可通过干预肝纤维化小鼠免疫微环境中的免疫调节因子IDO1及与免疫应答相关的树突状细胞,从而改善肝纤维化的机制研究。方法:利用CCL4及BDL诱导建立肝纤维化模型,先在野生型肝纤维化小鼠中确定IDO1与DCs参与肝纤维化的发生;体外模型检测IDO1与DCs表型成熟的相关性;进一步在体内观察IDO1基因缺失或过表达状态对DCs表型成熟的改变和对肝纤维化进程的影响。在此基础上,探讨IDO1与DCs是否为保肝宁抗肝纤维化的主要靶标及其分子机制并对保肝宁中所含6种化学成分进行检测,最后在体内探索保肝宁中所含化学成分-人参皂苷Rg1是否可通过参与IDO1与DCs表型的调控发挥抗肝纤维化作用。本研究结果采用SPSS 22.0软件分析数据、Graph Pad Prism7.0作图,以均数±标准误（X±SEM）表示。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.CCL4及 BDL诱导的野生型肝纤维化小鼠肝脏中IDO1表达水平显着升高且伴随着DCs成熟表型的降低以及CD3+CD4+T细胞比例和CD4+/CD8a+比值的降低。2.在LPS干预下,IDO1+/+BMDCs细胞的成熟表型较IDO1-/-BMDCs明显降低;IDO1抑制剂的浓度与IDO1+/+BMDCs细胞中CD11C+CD80+、CD11C+CD86+、CD11C+CD40+、CD11C+MHCⅡ+标记的细胞比例值之间存在正相关关系,且相关系数较高。3.IDO1基因缺失的肝纤维化小鼠肝脏中DCs表型成熟度增加,HSCs的活化减少,较野生型肝纤维化小鼠的肝纤维化程度明显减轻;而肝脏特异性过表达IDO1抑制了肝纤维化小鼠肝脏中DCs的表型成熟,加剧了胶原纤维的沉积,使CCL4及BDL诱导的肝纤维化明显加重。4.保肝宁中以下6种化学成分的含量分别为:丹酚酸B（2012.820ng/mL）、隐丹参酮（1932.013 ng/mL）、人参皂苷 Rg1（38487.28 ng/mL）、人参皂苷 Rb1（176646.543 ng/mL）、黄芪甲苷（1239.123 ng/mL）、毛蕊异黄酮（3116.211 ng/mL）。5.保肝宁和人参皂苷Rg1均可通过有效降低肝纤维化小鼠肝脏中IDO1表达水平继而促进DCs的成熟使DCs功能恢复发挥护肝、抗肝纤维化作用。结论:1.IDO1与DCs在小鼠肝纤维化中均有明显改变,同时IDO1的表达水平在DCs的成熟中发挥着重要作用。2.IDO1基因缺失能够减轻CCL4及BDL所诱导小鼠的肝纤维化,肝脏特异性过表达IDO1会加重CCL4及BDL所诱导小鼠的肝纤维化,可能是由于IDO1的表达水平影响了肝纤维化小鼠DCs免疫表型的成熟及HSCs的活化。3.保肝宁和人参皂苷Rg1均可通过参与IDO1对DCs表型的调控缓解肝纤维化。
施梅姐[4]（2020）在《疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的临床回顾性研究及其作用机制的网络药理学探索》文中研究表明目前,慢性乙型肝炎仍然是一个全球性的公共卫生问题,严重危害人民健康。肝纤维化是慢性乙型肝炎发展到肝硬化的必经中间环节,若不及时阻断,可进一步进展至肝硬化、门静脉高压及肝癌,甚至进展至终末期肝病危及生命。因此,阻断逆转肝纤维化、防止疾病进一步进展是慢性乙型肝炎的重要防治目标之一。但肝纤维化的治疗当前仍然是慢性乙型肝炎防治的难点问题。目前,现代医学研究的各类特异性的抗纤维化药物制剂绝大多数尚处于实验研究阶段。现代医学治疗慢性乙型肝炎肝纤维化主要是针对病因的治疗,即抗病毒治疗。恩替卡韦是国内外指南推荐的一线抗病毒治疗药物,具有强力抗病毒作用和低耐药的特点,但其存在HBe Ag转换率低的缺点,并且即使抗病毒治疗后仍有相当部分的病人存在肝纤维化进展。因此,如何阻止肝纤维化进展、提高HBe Ag转换率是当前乙肝肝纤维化治疗的难点问题。而大量的研究证实,中医药治疗肝纤维化具有良好的疗效而且无副作用,其疗效及优势已得到国内外学者的广泛认可。在过去的几十年中,诸多研究者针对中医药抗乙肝肝纤维化展开了大量的临床及实验研究。尽管临床上乙肝肝纤维化的辨证分型不统一,但是纵观近十年中医药防治肝纤维化的文献资料,疏肝健脾活血法越来越得到众医家、学者的认可。本人所在科室在既往的临床实践中亦发现疏肝健脾活血法联合抗病毒药治疗可明显改善乙肝肝纤维化患者的抗肝纤维化疗效、提高HBe Ag转换率,但缺乏客观的临床疗效评价及作用机制探讨。目的:本课题第一部分采用文献研究的方法,基于频数分析、复杂网络分析法及关联规则等数据挖掘的方法分析总结疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的用药配伍规律,以期为临床运用疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化提供用药参考。第二部分采用回顾性研究的方法观察疏肝健脾活血法对慢性乙型肝炎肝纤维化患者的病理肝纤维化分期、血清肝纤维化指标及肝脏硬度值等指标变化的影响,客观评价其临床疗效,为临床运用用提供客观依据。第三部分运用网络药理学的方法对前面研究总结的疏肝健脾活血法的五味核心药物进行研究,探讨疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的作用靶点、信号通路,以期为后续研究疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的实验研究提供客观的参考依据。方法:第一部分:基于数据挖掘的方法总结疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的用药规律以“中国知网”、“中国生物医学期刊引文数据库”、“重庆维普中文期刊数据库”、“万方医学网”为检索库,检索自建库至2020年9月的疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的现代文献,建立疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的现代文献研究数据库,进一步采用频数分析、复杂网络分析技术、关联规则分析等数据挖掘的方法分析总结疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的用药规律。第二部分:疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的临床研究采用回顾性研究的方法,纳入2010年1月至2020年9月在广东省中医院肝病科门诊及住院就诊的符合纳入排除标准的乙肝肝纤维化病例,分为治疗组与对照组进行回顾性观察,其中对照组服用恩替卡韦治疗,治疗组采用疏肝健脾活血法联合恩替卡韦治疗,收集疗程至少144周的患者的临床资料,比较疏肝健脾活血法联合恩替卡韦治疗与单用恩替卡韦治疗对乙肝肝纤维化患者的病理肝纤维化分期、肝脏硬度值、血清肝纤维化指标及HBe Ag转换率等指标的不同影响,客观评价疏肝健脾活血法联合恩替卡韦治疗乙肝肝纤维化的抗纤维化疗效与抗病毒疗效。第三部分:基于网络药理学探讨疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的作用机制通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）收集筛选疏肝健脾活血法核心药物的主要有效成分及靶点,通过检索Gene Cards、OMIM、Pharm Gkb三个数据库,收集整理乙肝肝纤维化相关的疾病靶点基因,然后运用Venn2.1在线工具绘制药物-疾病靶点的Venn图,获得中药-疾病交互靶点。然后利用STRING数据库及Cytoscape3.8.1软件绘制中药-疾病交互靶点的蛋白质相互作用（PPI）图以及筛选核心基因。最后利用DAVID数据库进行GO与KEGG通路富集分析,进一步分析探讨疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的作用关键靶点与信号通路。结果:第一部分:文献数据挖掘研究初步检索到疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的相关文献257篇,根据标题初筛合格的文献97篇,再根据纳入及排除标准对每一篇文献的内容进行人工筛选,剔除不合格文献后得到最终纳入合格文献48篇,涉及在乙肝肝纤维化治疗涉及处方48首、中药96味,总用药频次为537次,涉及中药种类17种。居前四位的药物种类分别是:补虚药>活血化瘀药>理气药>利水渗湿药,累计频率达88.3%。疏肝健脾活血法中使用频率最高的是补虚药,其次是活血化瘀药与理气药。其中补虚药有黄芪、白术、白芍、鳖甲、当归、党参等;活血化瘀药有丹参、赤芍、郁金、川芎、桃仁等;理气药有柴胡、枳壳、陈皮、香附等。进一步通过复杂网络分析后得到疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的核心药物包括柴胡、丹参、白芍、白术、黄芪、鳖甲、茯苓、赤芍、当归、枳壳、郁金等,居前五位的核心中药分别是:柴胡、丹参、白芍、白术、黄芪。其中理气药与补虚药、活血化瘀药最常见的配伍组合包括柴胡与白芍、丹参相伍,柴胡与白术、白芍相伍,柴胡与黄芪、丹参相伍等,柴胡与白芍是疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化最常见的药对。第二部分:临床研究初筛接受恩替卡韦抗病毒初始治疗的乙肝肝纤维化患者898例,二次筛选后共纳入385例接受恩替卡韦治疗144周的乙肝肝纤维化患者。其中完成治疗前后二次肝脏病理学评价患者共81例,完成治疗前后Fibro Scan检测的共83例,完成治疗前后血清肝纤维化指标检测的共114例。运用倾向性评分匹配两组患者的基线资料使两组具有可比性,结果纳入病理疗效分析44例,纳入血清肝纤维指标疗效分析102例,纳入肝脏硬度值疗效分析66例。在病理肝纤维化分期疗效评估方面,疏肝健脾活血法联合恩替卡韦治疗组的肝纤维化逆转率明显高于单用恩替卡韦组（95.5%vs 18.2%,P<0.001）。在肝纤维化进展方面,治疗组无一例发生肝纤维化进展,而对照组仍有50%的患者发生肝纤维化进展。在血清肝纤维化指标疗效评估方面,对照组的透明质酸（HA）水平较治疗前后无明显变化（40.9 vs 46.6,P=0.744）,而治疗组较治疗前下降（55.2 vs 41.4,P=0.003）,且治疗组治疗前后的差值明显高于对照组（P=0.02）。在Fibro Scan肝脏硬度值疗效评估方面,两组患者的肝脏硬度值均较治疗前下降（P均<0.05）,但与对照组相比,治疗组LSM值较治疗前下降的差值更大,但两组患者治疗前后的变化差值无统计学差异（P=0.142）。为进一步观察疏肝健脾活血法对乙肝肝纤维化患者抗病毒疗效的影响,选取70例ALT<2ULN的HBe Ag阳性乙肝肝纤维化患者为研究对象,结果发现两组患者的HBe Ag血清学转换率均逐年上升,但治疗组的HBe Ag转换率增加趋势高于对照组,治疗组48周、96周、144周的HBe Ag转换率分别为17.1%、26.5%、28.6%,高于对照组的2.9%、12.9%、10.3%;其中两组在48周时的HBe Ag转换率存在统计学差异（P=0.046）。第三部分:网络药理学研究基于以上文献与临床研究共同发现的疏肝健脾活血法的五味核心药物为柴胡、丹参、白芍、白术、黄芪,收集这五味核心药物的有效化学成分及靶点,并进一步获取乙肝肝纤维化的疾病靶点。结果共发现疏肝健脾活血法核心药物与乙肝肝纤维化疾病的交互靶点基因共有205个。PPI蛋白质互作网络分析发现疏肝健脾活血法核心药物治疗乙肝肝纤维化的关键靶点在于AKT1、TP53、CDK1、CCNA2、CCNB1、TOP2A、BIRC5、VEGFA、EGFR、CASP3等核心基因。GO分析发现6个最相关的生物过程,包括DNA转录、促进RNA聚合酶II启动子转录、促进DNA转录、炎症反应、抑制凋亡过程与促进细胞增殖;7个最相关的细胞成分,涉及细胞浆、细胞外间隙、细胞核、细胞膜的组成部分、胞外体、细胞质、细胞核仁等;9个最相关的分子功能,包括同源二聚体蛋白质活化、序列特异性DNA结合之转录因子活化、序列特异性DNA结合、血红素结合、序列特异性DNA结合之RNA聚合酶Ⅱ核心启动子近端区、DNA结合、染色质结合、锌离子结合、ATP结合。KEGG分析发现最相关的前10条通路分别是HIF-1、PI3K-Akt、Toll样受体、NF-kappa B、细胞凋亡、p53、NOD样受体、MAPK、VEGF、Fox O信号通路。结论:文献研究发现疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化存在一定的配伍规律,其中使用频率最高的是补虚药,其次是活血化瘀药与理气药。补虚药有黄芪、白术、白芍、鳖甲、当归、党参等;活血化瘀药有丹参、赤芍、郁金、川芎、桃仁等;理气药有柴胡、枳壳、陈皮、香附等。疏肝健脾活血法居前五位的核心中药分别是:柴胡、丹参、白芍、白术、黄芪。临床回顾性研究发现疏肝健脾活血法的中药治疗可协同提高恩替卡韦治疗乙肝肝纤维化的抗纤维化疗效与HBe Ag血清学转换率,但仍需下一步开展前瞻性、多中心、大样本的临床研究进一步。网络药理学研究发现疏肝健脾活血法的核心药物能通过多种细胞分子、多种生物过程、多条信号通路参与抗纤维化的过程,其主要作用于细胞浆、细胞外间隙、细胞核等多组分,通过调控HIF-1、PI3K-Akt、Toll样受体、NF-kappa B、细胞凋亡、p53、NOD样受体、MAPK、VEGF、Fox O等多条信号通路,参与同源二聚体蛋白质活化、序列特异性DNA结合、染色质结合、ATP结合等分子功能,调控DNA转录、促进RNA聚合酶II启动子转录、参与炎症反应、抑制凋亡过程与促进细胞增殖等生物过程发挥抗纤维化的治疗作用。但其具体的作用机制仍需下一步开展深入的实验研究进行验证。
刘静[5]（2020）在《小柴胡汤治疗非酒精性脂肪性肝炎功效作用网络研究及机制探讨》文中研究指明目的:本研究旨在探讨小柴胡汤治疗非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的功效作用网络及作用机制,以期为NASH新的临床治疗策略及小柴胡汤精准化用药提供实验研究证据。方法:以C57BL/6小鼠为研究对象,给予蛋氨酸胆碱缺乏（MCD）饮食诱导建立NASH模型小鼠,观察小鼠状态,HE染色分析肝脏组织病理变化,分析血清及肝组织脂质代谢和炎症相关指标变化,q RT-PCR实验初步探讨其降脂机制;选择游离脂肪酸（FFA）诱导建立L-02高脂细胞模型,观察小柴胡汤水提物对细胞脂质沉积及损伤程度的影响;运用网络药理学技术构建“疾病-方剂-靶点”网络,预测小柴胡汤治疗NASH的主要药效成分及关键靶点,并对关键靶点进行GO和Path Way富集分析,预测其潜在的药效作用网络,q RT-PCR实验对作用网络相关指标进行验证。结果:小柴胡汤可明显改善肝脏脂肪变性及炎症等变化,降低血清及肝组织中TG和TC水平,减少MDA和SOD的分泌,降低血清肝损伤标志物AST、ALT和LDH的浓度;q RT-PCR结果显示小柴胡汤可通过降低肝脏脂肪代谢相关基因FAS、SREBP-1c、SREBP-2和HMG-Co A及炎症相关指标TNF-α、IL-6和IL-1β的表达量发挥降脂抗炎作用。400μmol·L-1FFA诱导建立L-02高脂细胞模型,0.625～2.50 mg·m L-1小柴胡汤水提物可明显改善高脂细胞的脂变率,降低细胞中TC和TG含量、上清液中ALT和AST水平及细胞中炎症因子TNF-α和IL-6的表达。网络药理学预测小柴胡汤干预NASH主要是通过方中182个化学成分作用于NFKB2、NFKBIA等38个关键靶点,参与白介素信号、免疫系统、TRAF6介导的NF-κB激活等多条通路,通过检测NASH各组小鼠肝组织中相关基因的表达,给药小柴胡汤后,可显着降低NF-κB通路相关转录因子P65/Rel A、P50/NFKB1和P52/NFKB2的表达水平。结论:本研究运用体内、外研究手段结合网络药理学技术开展了小柴胡汤的药效及作用机制研究,明确小柴胡汤在体内、外水平上均有显着的降脂保肝作用且量效关系良好。高脂或游离脂肪酸诱导肝细胞脂肪变性可引起促炎因子TNF-α和IL-6等的表达,在促炎因子的作用下,TNF-α和NF-κB相互作用可构成炎症反应网络,通过对FAS、SREBP-1c等基因、炎症因子及NF-κB通路相关转录因子P65/Rel A、P50/NFKB1和P52/NFKB2表达水平检测结果提示小柴胡汤可能通过调控脂肪代谢相关基因及网络药理学预测所得白介素信号通路、免疫系统及NF-κB通路等发挥对NASH的降脂保肝作用。
李家焕[6]（2020）在《白花香莲解毒颗粒治疗HBeAg阳性慢性HBV携带状态患者的临床研究》文中认为目的:通过观察白花香莲解毒颗粒对HBe Ag阳性慢性HBV携带状态患者HBV DNA水平、HBe Ag水平、肝功能（ALT、AST）、肝硬度评分（LSM）、证候积分等因素,来评价白花香莲解毒颗粒治疗HBe Ag阳性慢性HBV携带状态患者临床疗效和安全性。方法:选取2018年6月至2019年1月在广西中医药大学第一附属医院就诊的HBe Ag阳性慢性HBV感染状态患者92例。按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组46人。两组患者治疗前的一般情况、HBV DNA水平、HBe Ag水平、肝功能（ALT、AST）、肝硬度评分（LSM）、证候积分无统计学意义（P>0.05）。治疗组患者予口服白花香莲解毒颗粒,对照组予中药安慰剂治疗,1包/次,2次/天,疗程48周;记录两组用药前后HBV DNA水平、HBe Ag水平、肝功能（ALT、AST）、肝硬度评分（LSM）、证候积分指标变化。结果:（1）在HBV DNA载量方面对比:治疗组在降低HBV DNA载量方面优于对照组,两组比较有统计学有意义（P<0.05）;（2）在HBe Ag水平方面对比:治疗组在降低HBe Ag水平的能力优于对照组,两组比较有统计学有意义（P<0.05）;（3）肝功能（ALT、AST）方面对比:在治疗前后两组患者ALT、AST在正常范围内,无统计学差异（P>0.05）;（4）在肝硬度评分（LSM）方面对比:治疗组在降低LSM方面优于对照组,两组比较有统计学有意义（P<0.05）;（5）在中医证候积分方面对比:治疗组在缓解患者症状方面优于对照组,两组比较有统计学有意义（P<0.05）。对接受治疗患者进行安全性研究分析,服药两组均未发现明显的毒副作用。结论:白花香莲解毒颗粒可有效缓解患者临床症状,明显降低患者HBV DNA载量、HBe Ag水平、肝硬度测定值（LSM）,提高患者生活质量,无明显药物不良反应。
印鑫[7]（2020）在《白首乌C-21甾苷对肝肾纤维化大鼠的干预作用及机制研究》文中指出白首乌是萝摩科（Asclepiadaceae）鹅绒藤属植物耳叶牛皮消（Cynanchum auriculatum Royle ex Wight）、隔山牛皮消（C.wilfordii（Maxim.）Hemsl.）及戟叶牛皮消（C.bungei Decne.）等植物的干燥块根。其味苦甘涩,性微温,无毒,人肝、肾二经,为滋补、强健、补益药。目前,白首乌在山东、江苏和安徽定远均有栽培品,其常用的药材来源于江苏省滨海县的耳叶牛皮消。白首乌含有多种化学成分,其中最重要的有C-21甾苷类、多糖类、苯乙酮类等活性成分,目前国内外学者对白首乌功效作用的研究主要集中在抗肿瘤、保肝护肝、抗氧化以及免疫调节等方面。基于前期研究基础,本文从建立一种肝脏及肾脏纤维化并存的复杂疾病动物模型出发,通过整体动物水平研究白首乌C-21甾苷类组分对大鼠肝脏及肾脏并存纤维化的干预作用及其内在机制,从而为白首乌补益肝肾功效提供现代科学阐释。第一章文献研究本章通过查阅国内外相关文献对不同品种白首乌C21甾体总苷、苯酮类化合物结构和含量的差异,不同品种白首乌多糖类成分和营养物质含量的差异,以及不同化学成分的药理活性进行系统归纳,为进一步合理利用白首乌的药用价值提供科学依据.第二章大鼠肝肾纤维化复合模型的建立与考察采用二乙基亚硝胺（DEN）和氯化汞（HgC12）复合因素诱导的方式,建立大鼠肝脏和肾脏纤维化并存模型。每2周对大鼠进行眼眶采血,8周后观察大鼠血清中肝肾功能相关指标—丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、血尿素氮（BUN）、乳酸脱氢酶（LDH）和尿酸（UA）的变化;纤维化四项指标—层粘连蛋白（Laminin,LN）、IV 型胶原（Collagen Type Ⅳ,CIV）、透明质酸（Hyaluronic Acid,HA）及 Ⅲ 型前胶原氨端肽（Procollagen ⅢN-terminal peptide,PⅢNP）的水平变化;大鼠肝脏和肾脏中羟脯氨酸（Hydroxyproline,Hyp）含量变化;以及大鼠肝肾组织的病理变化和组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGF-β1）以及肾组织中钙粘蛋白E（E-cadherin）的蛋白表达水平变化。结果显示,造模2周后,大鼠出现明显的肝肾功能功能损伤,造模4～6周时出现少量的胶原沉积和纤维化增生,纤维化相关标志物水平显着升高,造模8周后,大鼠肝肾纤维化程度进一步加重,表明大鼠肝肾纤维化并存模型建立成功。第三章DEN-HgCl2联合诱导大鼠肝肾纤维化复合模型的发病机制初探DEN-HgCl2联合诱导肝肾纤维化模型,观察大鼠肝肾组织中氧化应激损伤指标—丙二醛（MDA）的含量变化;谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、总抗氧能力（T-AOC）和过氧化氢酶（CAT）的活力变化;炎症相关因子IL-6和TNF-α mRNA的水平变化;以及肝及肾组织中MAPK/TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白—P38、ERK1/2、Smad2、Smad3、P-P38、P-ERK1/2、P-Smad2 和 P-Smad3 表达水平变化。结果显示,造模期间,大鼠肝肾组织中存在明显的氧化应激损伤,肝肾组织中炎症因子的mRNA的表达水平显着升高,同时MAPK/TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白磷酸化的水平且呈时间依赖性升高。第四章白首乌C-21甾苷对大鼠肝肾纤维化的干预作用研究基于成功建立的大鼠肝肾纤维化复合模型,本章主要研究白首乌C-21甾苷对大鼠肝肾功能和组织纤维化的影响。实验结果显示,首乌C-21甾苷干预后,肝肾纤维化大鼠肝肾功能指标—AST、ALT、ALP、T-BIL、LDH、BUN和UA的水平显着下降,肝肾组织中纤维化标志物—LN、CIV、HA、PIIINP和Hyp的水平显着降低,纤维化相关蛋白的表达水平也有所下调,同时病理学检查表明肝肾组织纤维化的程度有所改善,其中白首乌C-21甾苷高剂量组更为显着。第五章基于MAPK/TGF-β1/Smads信号通路的白首乌C-21甾苷防治大鼠肝肾纤维化的机制探讨本章主要研究白首乌C-21甾苷防治大鼠肝肾纤维化与MAPK/TGF-p1/Smads信号通路调控之间的关系。研究发现,经白首乌C-21甾苷高、低剂量给药干预后,大鼠肝和肾组织中GSH-PX、T-SOD、T-AOC和CAT的活力显着升高,且肝和肾组织中MDA含量均显着下降,肝肾组织中IL-6、TNF-α、collagen I和collagenⅢ的mRNA的表达水平也显着降低,同时白首乌C-21甾苷能明显调控MAPK/TGF-βi/Smads信号通路中相关蛋白的磷酸化水平。研究结论1.联合使用DEN-HgC122～4周时可诱导大鼠出现明显的肝肾损伤,6～8周时出现胶原沉积和纤维增生现象,并在8周后成功建立大鼠肝脏和肾脏纤维化并存模型。2.联合使用DEN-HgCl2可诱发大鼠肝肾组织出现氧化损伤,并激活MAPK/TGF-β1/Smads信号通路,促进相关炎症因子的表达以及胶原分泌,从而加速肝和肾组织器官纤维化的进程。3.白首乌C-21甾苷能明显减轻DEN-HgC12诱发的大鼠肝肾纤维化病变程度,抑制星状细胞活化和TGF-β1的表达,减少胶原沉积,有显着的抗肝肾纤维化作用。4.白首乌C-21甾苷对DEN-HgC12诱发的大鼠肝肾纤维化的干预作用机制可能与调控MAPK/TGF-β1/Smads信号通路、减轻大鼠肝肾组织的氧化应激损伤、抑制炎症因子表达以及阻止胶原沉积等密切相关.
张丽泳[8]（2020）在《生物活性肽通过调控PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬逆转SD大鼠肝纤维化的机制研究》文中研究表明目的研究生物活性肽治疗CCl4诱导SD大鼠肝纤维化的作用,探究生物活性肽调控PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬的作用机制。方法将40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、活性肽组和保肝汤组,每组10只。除空白组外的三组大鼠每周行两次腹腔注射CCl4,空白组注射等量生理盐水。4周后活性肽组行生物活性肽灌胃,保肝汤组行保肝汤灌胃,空白组和模型组行生理盐水灌胃,每周2次。治疗4周后称重,麻醉动物后致死,取血、收集肝脏组织并称重。计算肝指数后部分肝固定,制备石蜡切片,部分冻存于液氮中。肝脏石蜡切片行HE染色、MASSON染色,并通过免疫组织化学染色分析TGF-β1、PINK1与PARKIN蛋白的表达水平。通过血清生化指标ALT、AST的检测判断肝功能。通过ELISA检测肝脏组织内MMP1与TIMP1的水平。RT-q PCR法检测TGF-β1、PINK1与PARKIN基因的表达情况。结果与空白组相比,模型组大鼠的肝指数增加,ALT与AST含量均升高（P<0.05）,肝脏组织出现了明显病变,CCl4造模成功。与模型组大鼠相比,保肝汤组与活性肽组大鼠肝指数下降,ALT与AST水平下调,组织学染色结果表明肝脏组织受损程度得到控制,ELISA检测蛋白显示,MMP1蛋白表达水平增加,TIMP1蛋白表达水平下降（P<0.05）;免疫组织化学染色结果与q PCR结果进一步表明活性肽与保肝汤的治疗上调了PINK1与PARKIN的表达水平（P<0.05）,而显着抑制了TGF-β1表达水平。结论CCl4通过调节炎症趋化因子TGF-β1、介导PINK1与PARKIN的表达从而调控线粒体自噬过程,诱发SD大鼠肝纤维化;活性肽组与保肝汤组均可通过上调PINK1/PARKIN的表达水平从而促进线粒体自噬、下调TGF-β1的表达水平减轻肝纤维化,两种治疗方法都可延缓肝脏结构的改变,具有相同的保护逆转作用。
梁洁[9]（2020）在《蒙药七味清肝散经JAK2/STAT3通路抗肝纤维化作用的研究》文中认为目的:研究七味清肝散在体内、外的抗肝纤维化（Hepatic fibrosis,HF）作用,并利用一系列分子实验方法探索七味清肝散在体内、外抗肝纤维化的作用机制。方法:（1）Wistar大鼠50只,分为空白组、HF模型组以及七味清肝散低、中、高剂量组[135、270、405 mg/（kg?d）],除空白组外,各组均灌胃50%四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）花生油溶液,每周两次,给药组大鼠按相应剂量给予七味清肝散,每天一次。10周后,麻醉,取血,离心后用血清测定丙氨酸转氨酶（Alanine Aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（Aspartate transaminase,AST）、碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase,ALP）的含量;取肝脏组织,观察大体形态,称重,计算肝系数;取肝脏组织,测定羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）含量;另取肝脏组织,固定,包埋,切片后做HE和Masson染色,观察肝脏组织病理学变化;免疫组织化学法检测肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin,α-SMA）的表达;利用转录组测序技术,联合生物信息学分析,通过富集、筛选、检索大量文献后得到与肝纤维化相关的信号通路;提取肝组织中的RNA,利用q-PCR技术检测α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）、Janus激酶2（janus kinase 2,JAK2）、信号传导及转录激活蛋白（signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）m RNA的含量;提取肝脏组织中的蛋白,利用Western blotting技术检测α-SMA、CollagenⅠ、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3的表达水平。（2）Wistar大鼠16只,分为空白组和七味清肝散给药组[1350mg/（kg?d）],给药组每天灌胃一次,7天后,麻醉,取血,离心,同组血清合并,56℃灭活,滤膜过滤后,得含药血清。培养大鼠肝星状细胞（Hepatic stellate cell,HSC）,分为空白组、含药血清低（10%）、中（15%）、高（20%）剂量组。利用MTT法检测不同含药血清浓度[10%、15%、20%]及不同给药时间[24h、48h、72h]对细胞增殖的影响,确定七味清肝散对细胞增殖的抑制作用及最佳作用时间。提取细胞RNA,利用q-PCR技术检测α-SMA、CollagenⅠ、JAK2、STAT3 m RNA的含量;提取细胞蛋白,利用Western blotting技术检测α-SMA、CollagenⅠ、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3的表达水平。Annexin V-FITC和PI双染,经流式细胞仪检测HSC-T6细胞凋亡情况。结果:（1）空白组大鼠肝脏呈现鲜红色,柔软光滑;模型组大鼠肝脏呈现暗红色甚至黄色,非常粗糙;七味清肝散高、中、低剂量组大鼠肝脏呈现深红色,稍粗糙。与空白组相比,模型组大鼠肝脏系数显着增高（P<0.01）,ALT、AST、ALP、HYP含量均显着升高（P<0.01）;与模型组相比,七味清肝散低剂量组肝脏系数下降（P<0.05）,各剂量组ALT、AST、HYP含量均下降（P<0.01）,高剂量组ALP含量显着下降（P<0.01）。HE和Masson染色可见空白组大鼠肝小叶结构完整,肝细胞排列整齐,包浆均匀,未见变性坏死、炎症细胞浸润、纤维组织增生;模型组大鼠肝小叶结构破坏,肝板排列混乱,大量炎症细胞浸润、肝细胞气球样变、纤维组织增生,个别样本甚至出现桥接纤维化以及假小叶;七味清肝散各剂量组大鼠肝组织纤维增生减少,炎症细胞浸润减少,细胞变性、坏死减少。从Masson染色结果来看,与空白组比较,模型组胶原含量明显增多（P<0.01）;与模型组相比,各剂量组胶原含量均显着下降（P<0.01）。免疫组化结果显示,与空白组相比,模型组α-SMA阳性表达面积大大增大,而七味清肝散各剂量组有所减少。q-PCR结果显示,与空白组比较,模型组大鼠α-SMA、CollagenⅠm RNA水平均显着上升（P<0.05）;与模型组比较,七味清肝散各剂量组α-SMA、CollagenⅠm RNA水平显着下降（P<0.05）。Western blotting结果显示,与空白组相比,模型组大鼠α-SMA、CollagenⅠ蛋白含量显着上升（P<0.01,P<0.05）;与模型组相比,七味清肝散各剂量组α-SMA、CollagenⅠ蛋白含量均显着下降（P<0.01）。（2）转录组测序结果富集、检索文献后得到JAK/STAT信号通路进行后续研究。（3）体内实验q-PCR结果显示,与空白组比较,模型组大鼠JAK2、STAT3 m RNA水平均显着上升（P<0.05）;与模型组比较,七味清肝散高剂量组STAT3 m RNA水平显着下降（P<0.01）;低剂量组JAK2 m RNA水平显着下降（P<0.05）。Western blotting结果显示,与空白组相比,模型组大鼠JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3（P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05）蛋白含量显着上升;与模型组相比,七味清肝散各剂量组JAK2、p-JAK2、STAT3蛋白含量均显着下降（P<0.01）;七味清肝散高、中剂量组p-STAT3蛋白含量显着下降（P<0.01,P<0.05）。体外实验q-PCR结果显示,与对照组相比,各剂量含药血清组α-SMA、JAK2、STAT3的m RNA表达量均显着下降（P<0.01）;各剂量含药血清组CollagenⅠm RNA含量均显着下降（P<0.01,P<0.05,P<0.01）。Western Blotting结果显示,与对照组相比,含药血清低剂量组α-SMA、CollagenⅠ、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达量均显着下降（P<0.01）;含药血清中剂量组α-SMA、CollagenⅠ、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达量显着下降（P<0.01）;含药血清高剂量组α-SMA、CollagenⅠ、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达量显着下降（P<0.01）。MTT结果显示,24 h,含药血清各剂量组OD值显着下降（P<0.01）,增殖抑制率为42.95%、50.89%、44.93%;48 h,含药血清中、高剂量组OD值显着下降（P<0.01）,增殖抑制率为32.03%、33.55%;72 h,含药血清各剂量组OD值显着下降（P<0.01）,增殖抑制率为21.36%、33.26%、33%。而24 h、48 h及72 h各含药血清组的细胞增殖抑制率没有显着差别（P>0.05）,故选择给药后24 h进行后续实验操作。流式细胞术结果显示,与对照组相比,含药血清低、高剂量组细胞凋亡率显着增高（P<0.01,P<0.05）。结论:七味清肝散是通过降低大鼠血清中ALT、AST、ALP含量,肝脏中HYP含量及α-SMA、CollagenⅠm RNA和蛋白表达水平来产生抗HF的作用;同时,降低HSC-T6细胞中α-SMA、CollagenⅠm RNA和蛋白含量以及抑制其增殖、促进凋亡来产生抗HF的作用。七味清肝散通过下调JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3 m RNA及蛋白的表达水平从而抑制JAK2/STAT3信号通路,进而产生抗HF的作用。
李璐茜[10]（2020）在《基于TGF-β1/Smad及NF-κB双信号途径探讨屏边三七皂苷抗肝纤维化作用机制》文中研究表明屏边三七为五加科人参属植物屏边三七Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng的根及根茎,具有“消炎定痛,保肝抗癌”之功效,含有齐墩果烷型五环三萜类皂苷成分,民间对于治疗肝炎具有良好的效果。目前屏边三七是一种待开发的、具有高经济价值的药用植物资源,前期研究发现屏边三七皂苷具有保肝作用,但其作用机制尚不清楚。因此,本文考察了屏边三七皂苷抑制肝纤维化的作用机制,一方面,利用经典炎症细胞模型脂多糖（LPS）诱导小鼠巨噬细胞Raw264.7细胞,探究屏边三七皂苷对NF-κB通路上相关蛋白和细胞因子的影响,另一方面利用活化大鼠肝星状细胞（HSC-T6）及四氯化碳（CCl4）致大鼠肝纤维化模型从体外体内探讨了屏边三七皂苷对TGF-β1/Smad信号通路介导的肝纤维化的抑制作用。本次主要研究内容与结果如下:1.屏边三七总皂苷（PS）、屏边三七皂苷R1（PS-R1）和屏边三七皂苷R2（PS-R2）对LPS诱导的RAW246.7细胞NF-κB信号通路的影响。1.1屏边三七皂苷对Raw264.7细胞存活率的影响。PS在浓度为0.02～1 mg/mL时,对细胞存活率无抑制作用;PS-R1和PS-R2在浓度为1～30μmol/L时,对细胞存活率无明显抑制作用,而PS-R1和PS-R2在浓度达到50μmol/L时,细胞活性受到一定的抑制作用。1.2屏边三七皂苷对LPS诱导Raw264.7细胞产生一氧化氮（NO）的抑制作用。PS在浓度为0.02～0.5 mg/mL时可显着降低Raw264.7细胞分泌的NO含量（p<0.05,p<0.01,p<0.001）,且有一定的剂量依赖性。PS-R1在浓度为1～30μmol/L时均可显着降低Raw264.7细胞分泌的NO含量（p<0.05,p<0.01）,而PS-R2无抑制作用。1.3屏边三七皂苷对LPS诱导Raw264.7细胞产生肿瘤坏死因子（TNF）-α含量变化的影响。PS在浓度为0.1～0.5 mg/mL时、PS-R1和PS-R2在浓度为1～30μmol/L时均对LPS诱导Raw264.7细胞上清液中TNF-α含量有下调作用（p<0.05,p<0.01）。1.4屏边三七皂苷对LPS诱导的Raw264.7细胞中转录因子（NF-κB）和白细胞介素IL-1βmRNA水平的影响。PS（0.5 mg/mL）抑制了IL-1β的mRNA表达（p<0.001）,而对NF-κB无明显抑制作用;PS-R1（30μmol/L）和PS-R2（30μmol/L）显着抑制了细胞中NF-κB和IL-1β的mRNA表达（p<0.01）。1.5屏边三七皂苷对LPS诱导的Raw264.7细胞中NF-κB蛋白表达的影响。PS对Raw264.7巨噬细胞中细胞核NF-κB蛋白的表达有抑制作用,且对浓度有依赖性。当浓度达到0.5 mg/mL时,其抑制效果最显着。PS-R1和PS-R2对细胞核NF-κB蛋白的表达抑制作用不显着。2.屏边三七皂苷对大鼠肝星状细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响2.1屏边三七皂苷对大鼠肝星状细胞（HSC-T6）细胞存活率的影响。PS在浓度为0.02～1 mg/mL时对HSC-T6细胞的增殖和生长无明显抑制作用;PS-R1在浓度为0.5～30μmol/L时对HSC-T6细胞,无明显抑制作用,当浓度达到50μmol/L时,对HSC-T6细胞的增殖和生长有一定的抑制作用;PS-R2在浓度为1～100μmol/L时对HSC-T6细胞无明显抑制作用。2.2屏边三七皂苷对HSC-T6细胞中转化生长因子（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、平滑肌蛋白（α-SMA）、Smad3和Smad4 mRNA水平的影响。PS在浓度为0.1～0.5 mg/mL时,对HSC-T6细胞中α-SMA、Smad3和Smad4的mRNA水平均有明显的下调作用,且具有一定的浓度依赖性（p<0.05,p<0.01,p<0.001）。PS在浓度0.5 mg/mL时,对TGF-β1 mRNA表达有显着抑制作用（p<0.001）,而在低浓度时无影响。PS-R1在浓度为1～30μmol/L时,对HSC-T6细胞中α-SMA mRNA水平均有显着下调作用（p<0.01,p<0.001）。在高浓度30μmol/L时,PS-R1对TGF-β1、Smad3及Smad4水平有显着下调作用（p<0.05,p<0.001）。PS-R2在浓度为1～30μmol/L时,对HSC-T6细胞中α-SMA mRNA水平有显着的下调作用（p<0.01,p<0.001）,而对TGF-β1 mRNA水平无显着影响。在高浓度30μmol/L时,PS-R2显着抑制了HSC-T6细胞中Smad3、Smad4 mRNA水平（p<0.05,p<0.01）。2.3屏边三七皂苷对HSC-T6细胞中α-SMA、Smad3、Smad4及NF-κB蛋白表达的影响。Western Blot分析表明,PS在浓度为0.1～0.5 mg/mL时,对HSC-T6细胞中Smad3、α-SMA、NF-κB的蛋白表达均有显着的下调作用,且呈剂量依赖性,而其对Smad4蛋白表达无明显抑制作用。PS-R1和PS-R2在浓度为1～30μmol/L时,对HSC-T6细胞中Smad3的蛋白表达均有显着的下调作用,且具有一定的浓度依赖性。PS-R1和PS-R2对α-SMA和Smad4在HSC-T6细胞内的蛋白表达有一定的抑制作用。2.4屏边三七皂苷与蛋白Smad3、Smad4的分子对接情况。结果表明,PS-R2与Smad3蛋白结合效果最好,亲和度最高。PS-R2结合到Smad3蛋白活性位点,与活性位点的蛋白具有较好的匹配,切合活性位点的Gln386、Val 385、Asn400、Thr 246、Ser 235、Tyr 237形成氢键相互作用,这些相互作用促进了小分子稳定结合到蛋白活性位点从而发挥生物活性。3.屏边三七皂苷对CCl4诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响。3.1屏边三七皂苷对CCl4诱导的肝纤维化大鼠血清中ALT、AST的影响。与空白组相比,模型组大鼠血清中ALT、AST水平显着增加（p<0.001）。与模型组相比,各剂量给药组PS（100、150、200 mg/kg）显着降低ALT、AST含量（p<0.05,p<0.01,p<0.001）。PS-R2中剂量组（10 mg/kg）、高剂量组（30 mg/kg）显着降低ALT、AST含量（p<0.01,p<0.001）,其中低剂量组无显着差异。3.2屏边三七皂苷对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝脏组织病理切片的影响。大鼠肝脏组织病理切片结果分析表明,空白组大鼠肝细胞形态正常,未见纤维沉积,无病理性改变;模型组大鼠肝细胞排列紊乱,肝细胞坏死明显,汇管区纤维组织增生明显,明显病理性改变。与模型组相比,PS、PS-R2低剂量组（100、1mg/kg）的大鼠汇管区纤维结缔组织增生略微减轻;PS中、高剂量组（150、200 mg/kg）及PS-R2中、高剂量组（10、30 mg/kg）中大鼠肝脏汇管区仅有少量纤维组织增生,肝细胞变性坏死明显减轻,少量淋巴细胞浸润;其中高剂量肝损伤程度较轻于阳性组。3.3屏边三七皂苷对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织内NF-κB信号通路上NF-κB和p-NF-κB蛋白表达的影响。Western Blot分析表明,与模型组相比,PS在浓度为100～200mg/kg时,对肝组织中NF-κB和p-NF-κB的蛋白表达均有显着的下调作用。PS-R2在浓度为1～30 mg/kg时,对肝组织中NF-κB和p-NF-κB的蛋白表达均有显着的下调作用,且呈现浓度依赖性。3.4屏边三七皂苷对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织内TGF-β1/Smad信号通路上Smad3和Smad4蛋白表达的影响。与模型组相比,PS和PS-R2在浓度分别为100～200 mg/kg、1～30 mg/kg时,对肝组织中Smad3和Smad4的蛋白表达均有显着的下调作用,且具有一定的浓度依赖性。3.5屏边三七皂苷对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织内TGF-β1/Smad信号通路中TGF-β1、Smad3和Smad4蛋白免疫组化检测结果。免疫组化检测结果显示,与空白对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF-β1、Smad3/4蛋白水平显着增加;与模型组相比,给药PS高剂量组（200 mg/kg）显着下调TGF-β1、Smad3/4蛋白水平,而PS-R2抑制作用不显着。综上所述,屏边三七总皂苷及其单体皂苷对肝纤维化具有保护作用,可能与TGF-β1/Smad及NF-κB双信号途径相关。
二、保肝宁抗大鼠肝纤维化的作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、保肝宁抗大鼠肝纤维化的作用（论文提纲范文）
（1）基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 中医药学治疗肝纤维化的研究进展 |
| 综述二 现代医学对肝纤维化的研究进展 |
| 综述三 益气活血法对肝窦内皮细胞细胞生物学影响的研究 |
| 参考文献 |
| 第二部分 基于益气活血法治疗肝纤维化临床疗效的Meta分析 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 芪术颗粒对肝纤维化模型大鼠的影响研究 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 结论 |
| 实验二 大鼠肝窦内皮细胞的原代分离与提取 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三 芪术颗粒含药血清对肝窦内皮细胞胞内一氧化氮合成酶、一氧化氮的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 芪术颗粒含药血清对肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质影响的研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 创新性 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附件 |
| 中医药科技查新报告书 |
（2）活血软坚扶正方干预乙肝后肝纤维化的临床疗效研究及机制探索（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语 |
| 文献综述 TGF-β1相关通路在乙肝后肝纤维化方面研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一章 网络药理学研究 |
| 第一节 资料与方法 |
| 1 活血软坚扶正方活性化学成分与作用靶点的获取和筛选 |
| 2 乙肝后肝纤维化相关作用靶点的筛选 |
| 3 药物-活性成分-疾病相关靶点网络的构建 |
| 4 蛋白相互作用网络的构建与核心靶标筛选 |
| 5 生物过程与信号通路富集分析 |
| 第二节 活血软坚扶正方网络药理学研究结果 |
| 1 活血软坚扶正方活性成分的筛选 |
| 2 疾病相关靶点预测 |
| 3 药物-活性成分-疾病相关靶点网络构建 |
| 4 蛋白相互作用网络的构建与核心靶标筛选 |
| 5 GO基因功能富集分析 |
| 6 KEGG通路富集分析 |
| 第三节 小结与讨论 |
| 1 活血软坚扶正方有效活性成分讨论 |
| 2 活血软坚扶正方抗乙肝后肝纤维化相关靶标蛋白讨论 |
| 3 活血软坚扶正方抗乙肝后肝纤维化相关信号通路讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 临床研究 |
| 第一节 资料与方法 |
| 1 一般资料 |
| 2 诊断标准 |
| 3 纳入标准 |
| 4 排除标准 |
| 5 退出标准 |
| 6 剔除标准 |
| 7 中止标准 |
| 8 治疗方法 |
| 9 观察指标 |
| 10 统计学方法 |
| 第二节 研究结果 |
| 1 基线情况 |
| 2 疗效比较 |
| 3 安全性指标检测 |
| 4 脱落病例分析 |
| 第三节 小结与讨论 |
| 1 讨论 |
| 2 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）保肝宁和人参皂苷Rg1对肝纤维化小鼠IDO1及树突状细胞的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 现代医学对肝纤维化的研究现状 |
| 第二节 IDO1与树突状细胞在肝纤维化的研究进展 |
| 第三节 中医学对肝纤维化的认识 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 体内模型检测肝纤维化小鼠体内IDO1表达水平与DCs免疫表型的改变 |
| 第二节 体外模型检测IDO1与DCs免疫表型的相关性 |
| 第三节 IDO1基因缺失或过表达状态对DCs免疫表型的改变及其对肝纤维化进程的影响 |
| 第四节 保肝宁对肝纤维化小鼠体内IDO1与DCs免疫表型的调控作用 |
| 第五节 保肝宁汤剂中的化学成分-人参皂苷Rg1对CCL_4诱导肝纤维化小鼠的保护作用 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（4）疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的临床回顾性研究及其作用机制的网络药理学探索（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 慢性乙型肝炎肝纤维化的西医研究进展 |
| 一、现代医学对乙肝肝纤维化发病机制的认识 |
| 二、乙肝肝纤维化相关的信号通路研究现状 |
| 三、乙肝肝纤维化的现代诊断技术 |
| 四、乙肝肝纤维化的西医治疗现状 |
| 五、展望与体会 |
| 第二节 慢性乙型肝炎肝纤维化的中医研究进展 |
| 一、慢性乙型肝炎肝纤维化的病因病机研究 |
| 二、慢性乙型肝炎肝纤维化的中医辨证分型 |
| 三、慢性乙型肝炎肝纤维化的中医药治疗 |
| 四、展望 |
| 第三节 疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的理论依据与临床应用概况 |
| 一、疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的理论依据 |
| 二、疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的临床应用概况 |
| 第四节 数据挖掘技术在中医药研究领域的运用现状 |
| 一、频数分析技术 |
| 二、关联规则挖掘技术 |
| 三、聚类分析技术 |
| 四、复杂网络分析技术 |
| 五、贝叶斯网络 |
| 六、因子分析技术 |
| 第五节 网络药理学在中医药研究领域运用的研究进展 |
| 一、网络药理学的研究方法 |
| 二、网络药理学在中医药领域的运用 |
| 三、不足与展望 |
| 第二章 疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的用药规律探讨 |
| 一、资料与方法 |
| (一)资料来源 |
| (二)文献纳入标准 |
| (三)文献排除标准 |
| (四)文献检索策略 |
| (五)资料提取 |
| (六)数据预处理 |
| (七)统计方法 |
| 二、结果 |
| (一)一般情况 |
| (二)单味中药选用频数及频数分布 |
| (二)药物种类频数及频数分布 |
| (三)基于复杂网络技术分析疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的核心药物 |
| (四)基于关联规则技术分析疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的常用药物配伍规律 |
| 三、讨论 |
| 第三章 疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的临床研究 |
| 一、研究目的 |
| 二、研究内容 |
| 三、研究方法 |
| 四、研究方案 |
| 五、研究结果 |
| (一)一般情况 |
| (二)疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化患者的抗纤维化疗效分析 |
| (三)疏肝健脾活血法对乙肝肝纤维化患者抗病毒疗效的影响 |
| (四) 安全性分析 |
| 六、讨论 |
| 第四章 基于网络药理学探讨疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的作用机制 |
| 一、研究概要 |
| 二、材料与方法 |
| 三、结果 |
| (一)疏肝健脾活血法核心药物的潜在有效成分及相关靶点 |
| (二) “中药-疾病”交互靶点的筛选 |
| (三) “中药-疾病”交互靶点PPI网络的构建及核心基因的筛选 |
| (四) “中药-疾病”交互靶点的GO和KEGG富集分析 |
| 四、讨论 |
| 结语 |
| 一、主要结论 |
| 二、创新点 |
| 三、不足之处 |
| 四、展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 统计学审核证明 |
（5）小柴胡汤治疗非酒精性脂肪性肝炎功效作用网络研究及机制探讨（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstracts |
| 引言 |
| 第一部分 非酒精性脂肪性肝炎与小柴胡汤的研究进展 |
| 1 非酒精性脂肪性肝炎的研究进展 |
| 1.1 现代医学对非酒精性脂肪性肝炎的认识 |
| 1.2 中医对非酒精性脂肪性肝炎的认识 |
| 2 小柴胡汤治疗非酒精性脂肪性肝炎的理论依据 |
| 3 小柴胡汤文献梳理 |
| 3.1 小柴胡汤方解及功效作用研究 |
| 3.2 小柴胡汤药理作用的研究 |
| 3.3 小柴胡汤治疗肝脏疾病的临床应用 |
| 4 小结 |
| 第二部分 小柴胡汤对非酒精性脂肪性肝炎小鼠的药效研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 小柴胡汤对非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠体重和日食量的影响 |
| 3.2 小柴胡汤对非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠肝脏湿重及肝脏系数的影响 |
| 3.3 小柴胡汤对非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠肝组织病理变化的影响 |
| 3.4 小柴胡汤对非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠肝脏脂肪变性相关指标的检测 |
| 3.5 小柴胡汤对非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠肝脏损伤相关指标的检测 |
| 4 小结 |
| 第三部分 小柴胡汤对游离脂肪酸诱导L-02 细胞高脂模型体外药效研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 游离脂肪酸诱导L-02 细胞高脂模型的建立 |
| 3.2 小柴胡汤对游离脂肪酸诱导L-02 高脂细胞模型的保护作用 |
| 4 小结 |
| 第四部分 小柴胡汤对非酒精性脂肪性肝炎功效作用网络预测及实验验证 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 小柴胡汤的化学成分及靶标筛选 |
| 3.2 小柴胡汤药效成分筛选 |
| 3.3 小柴胡汤治疗非酒精性脂肪性肝炎网络构建与分析 |
| 3.4 小柴胡汤治疗非酒精性脂肪性肝炎作用机制探讨 |
| 3.5 小柴胡汤治疗非酒精性脂肪性肝炎作用机制验证 |
| 4 小结 |
| 第五部分 结语 |
| 1 对实验研究部分的讨论 |
| 2 本研究的现实意义与创新点 |
| 3 本研究的不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 论文着作 |
| 科研课题 |
（6）白花香莲解毒颗粒治疗HBeAg阳性慢性HBV携带状态患者的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 传统医学对慢性乙型肝炎的认识 |
| 1.1 病名的认识 |
| 1.2 中医对慢性乙型肝炎病因病机的认识 |
| 1.3 壮医对慢性乙型肝炎病因病机的认识 |
| 1.4 慢性乙型肝炎中医辨证论治 |
| 1.5 慢性乙型肝炎壮医论治 |
| 1.6 壮医药治疗慢性乙型肝炎 |
| 1.6.1 壮药联合阿德福韦酯 |
| 1.6.2 壮药联合恩替卡韦 |
| 1.6.3 壮药联合拉米夫定 |
| 1.6.4 根据西医适应证选择用药 |
| 2 现代医学对慢性乙型肝炎的研究 |
| 2.1 流行病学 |
| 2.2 发病机制的研究进展 |
| 2.3 现代医学对慢性乙型肝炎治疗的研究进展 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 研究方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.1.1 病例来源 |
| 1.1.2 病例总数 |
| 1.1.3 纳入标准 |
| 1.1.4 排除标准 |
| 1.1.5 脱落标准 |
| 2 治疗方案及流程 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 中药组治疗方案 |
| 2.3 对照组治疗方案 |
| 2.4 观察期限 |
| 2.5 用药随访 |
| 3 疗效评估指标 |
| 3.1 一般资料 性别、年龄、体重、身高等 |
| 3.2 症状分级与积分判断标准 |
| 3.3 实验室指标检验值范围 |
| 3.4 中医证候疗效评定标准 |
| 3.5 安全性指标 |
| 4 数据收集及统计 |
| 5 基数资料比较 |
| 5.1 一般资料 |
| 5.2 实验室资料 |
| 5.3 两组受试者治疗前证候积分比较 |
| 第三部分 结果 |
| 1 两组患者治疗前后中医证候疗效比较 |
| 2 两组受试者不同时间点 HBV DNA 水平比较 |
| 3 两组受试者治疗24、48wk HBeAg水平比较 |
| 4 两组受试者治疗前、后肝硬度测定值(LSM)检测情况 |
| 5 两组受试者治疗0、24、48周时证候积分比较 |
| 6 两组患者肝功能比较((?)±S,U/L) |
| 7 安全性分析 |
| 第四部分 讨论 |
| 1 慢性HBV感染者治疗困境 |
| 2 中西结合治疗HBeAg阳性CHB的优势探讨 |
| 3 从“毒虚致病”理论探讨CHB的中医治疗 |
| 4 白花香莲解毒颗粒的组方理论探讨 |
| 5 白花香连解毒颗粒的前期研究 |
| 6 白花香莲解毒颗粒治疗慢性HBV携带状态患者的临床结果分析 |
| 7 存在问题及展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 病毒性肝炎常见症状分级量化表 |
| 英文缩略词表 |
| 综述 慢性肝病的壮医药研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 在校期间发表论文 |
（7）白首乌C-21甾苷对肝肾纤维化大鼠的干预作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章: 文献综述 |
| 参考文献 |
| 第二章: 建立并考察大鼠肝肾纤维化复合模型 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料 |
| 2.3 方法 |
| 2.4 结果 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 结论 |
| 参考文献 |
| 第三章: DEN-HgCl_2联合诱导大鼠肝肾纤维化复合模型的发病机制初探 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料 |
| 3.3 方法 |
| 3.4 结果 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 结论 |
| 参考文献 |
| 第四章: 白首乌C-21甾苷对大鼠肝肾纤维化的干预作用研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料 |
| 4.3 方法 |
| 4.4 结果 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 结论 |
| 参考文献 |
| 第五章: 基于MAPK/TGF-β_1/Smads信号通路的白首乌C-21甾苷防治大鼠肝肾纤维化的机制探讨 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料 |
| 5.3 方法 |
| 5.4 结果 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 攻读硕士期间取得学术成果 |
| 致谢 |
（8）生物活性肽通过调控PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬逆转SD大鼠肝纤维化的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 线粒体自噬的分子机制及其对肝脏疾病潜在治疗价值的研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（9）蒙药七味清肝散经JAK2/STAT3通路抗肝纤维化作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 中蒙药治疗肝纤维化分子信号通路的研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（10）基于TGF-β1/Smad及NF-κB双信号途径探讨屏边三七皂苷抗肝纤维化作用机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 五环三萜类化合物在治疗肝病的研究进展 |
| 1.1.1 五环三萜类化合物的结构 |
| 1.1.2 五环三萜类化合物的生物活性 |
| 1.1.3 五环三萜类化合物在治疗肝病上的应用 |
| 1.2 肝纤维化与TGF-β1/Smad及 NF-κB信号通路的关系 |
| 1.2.1 Smads家族分类 |
| 1.2.2 TGF-β1 介导Smad2/3 磷酸化与肝纤维化 |
| 1.2.3 NF-κB通路与肝纤维化 |
| 1.3 五环三萜类化合物治疗肝纤维化的作用机理研究 |
| 1.4 立题背景和意义 |
| 1.5 研究内容与技术路线 |
| 1.5.1 研究目的 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 1.5.3 技术路线 |
| 1.5.4 研究创新性 |
| 第二章 屏边三七皂苷对LPS诱导的RAW246.7细胞NF-κB信号通路的影响 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 实验用细胞 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.2.3 实验仪器和设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养 |
| 2.3.2 细胞复苏 |
| 2.3.3 细胞传代 |
| 2.3.4 细胞换液 |
| 2.3.5 细胞冻存 |
| 2.3.6 细胞计数 |
| 2.3.7 铺板(以96孔板为例) |
| 2.3.8 细胞加样和收样 |
| 2.3.9 培养基的配置 |
| 2.3.10 CCK8细胞活性试验 |
| 2.3.11 炎症因子检测实验 |
| 2.3.12 荧光定量实验 |
| 2.3.13 Western-blot实验 |
| 2.3.14 蛋白质浓度的测定 |
| 2.3.15 实验样品的制备 |
| 2.3.16 统计学分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 屏边三七皂苷对Raw264.7细胞存活率的影响 |
| 2.4.2 屏边三七皂苷对LPS诱导Raw264.7 细胞上清液中NO含量变化的影响 |
| 2.4.3 屏边三七皂苷对LPS诱导Raw264.7 细胞上清液中TNF-α含量变化的影响 |
| 2.4.4 屏边三七皂苷对LPS诱导的Raw264.7 细胞中NF-κB信号通路上相关蛋白mRNA水平的影响 |
| 2.4.5 屏边三七皂苷对LPS诱导的Raw264.7 细胞中NF-κB信号通路上相关蛋白表达的影响 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 小结 |
| 第三章 屏边三七皂苷对大鼠肝星状细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 实验用细胞 |
| 3.2.2 实验试剂 |
| 3.2.3 实验仪器和设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 细胞培养 |
| 3.3.2 细胞复苏 |
| 3.3.3 细胞传代 |
| 3.3.4 细胞换液 |
| 3.3.5 细胞冻存 |
| 3.3.6 细胞计数 |
| 3.3.7 铺板(以6孔板为例) |
| 3.3.8 细胞加样和收样 |
| 3.3.9 培养基的配置 |
| 3.3.10 CCK8细胞活性实验 |
| 3.3.11 荧光定量实验 |
| 3.3.12 蛋白质浓度的测定 |
| 3.3.13 Western-blot实验 |
| 3.3.14 分子对接实验 |
| 3.4 .实验结果 |
| 3.4.1 屏边三七皂苷对HSC-T6细胞存活率的影响 |
| 3.4.2 屏边三七皂苷对TGF-β1/Smad信号通路上相关蛋白mRNA水平的影响 |
| 3.4.3 屏边三七皂苷对TGF-β1/Smad信号通路上相关蛋白表达的影响 |
| 3.4.4 屏边三七皂苷对TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白与化合物分子对接情况的检测 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 小结 |
| 第四章 屏边三七皂苷通过TGF-β1/Smad及 NF-κB双信号通路抑制大鼠肝纤维化的作用机制 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 实验试剂 |
| 4.2.3 实验器材 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 四氯化碳致大鼠肝纤维化模型 |
| 4.3.2 大鼠血清因子(ALT、AST)的检测 |
| 4.3.3 蛋白质浓度测定 |
| 4.3.4 Western-blot实验 |
| 4.3.5 大鼠肝脏组织病理切片 |
| 4.3.6 大鼠肝脏组织免疫组织化学分析 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 肝纤维化模型成功判定标准 |
| 4.4.2 屏边三七皂苷对大鼠血清中ALT、AST的影响 |
| 4.4.3 屏边三七皂苷对大鼠肝脏组织病理切片的影响 |
| 4.4.4 屏边三七皂苷对大鼠肝脏组织内与NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响 |
| 4.4.5 屏边三七皂苷对大鼠肝脏组织内与TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达的影响 |
| 4.4.6 屏边三七皂苷对大鼠肝脏组织内与TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白免疫组化检测结果 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 小结 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 硕士期间发表论文目录 |
四、保肝宁抗大鼠肝纤维化的作用（论文参考文献）
- [1]基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制[D]. 张强. 中国中医科学院, 2021
- [2]活血软坚扶正方干预乙肝后肝纤维化的临床疗效研究及机制探索[D]. 田园硕. 北京中医药大学, 2021(08)
- [3]保肝宁和人参皂苷Rg1对肝纤维化小鼠IDO1及树突状细胞的作用机制研究[D]. 莫婵. 南方医科大学, 2021
- [4]疏肝健脾活血法治疗乙肝肝纤维化的临床回顾性研究及其作用机制的网络药理学探索[D]. 施梅姐. 广州中医药大学, 2020(09)
- [5]小柴胡汤治疗非酒精性脂肪性肝炎功效作用网络研究及机制探讨[D]. 刘静. 山东中医药大学, 2020(01)
- [6]白花香莲解毒颗粒治疗HBeAg阳性慢性HBV携带状态患者的临床研究[D]. 李家焕. 广西中医药大学, 2020(02)
- [7]白首乌C-21甾苷对肝肾纤维化大鼠的干预作用及机制研究[D]. 印鑫. 南京中医药大学, 2020(08)
- [8]生物活性肽通过调控PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬逆转SD大鼠肝纤维化的机制研究[D]. 张丽泳. 内蒙古医科大学, 2020(03)
- [9]蒙药七味清肝散经JAK2/STAT3通路抗肝纤维化作用的研究[D]. 梁洁. 内蒙古医科大学, 2020(03)
- [10]基于TGF-β1/Smad及NF-κB双信号途径探讨屏边三七皂苷抗肝纤维化作用机制[D]. 李璐茜. 昆明理工大学, 2020
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